Кд 30: КД 30 по стандарту: Альбом РК 1101-87

3.Обсуждение

CD30 + PCLCL обычно встречается у взрослых в возрасте 45–60 лет и в шесть раз чаще встречается у мужчин [5]. Он представляет собой от одного до нескольких локализованных узелков или опухолей с изъязвлением. В 20% случаев многоочаговые, чаще всего поражаются туловище и конечности. Бляшки в большинстве случаев превышают 1 см (77%). Дренирование лимфатических узлов является положительным результатом примерно в 25% случаев. Дополнительными общими признаками являются язвы эпидермиса (63%), выраженная пролиферация сосудов (60%), псевдоэпителиоматозная гиперплазия (55%), некроз опухоли (55%) и инфильтрация сосудов опухолевыми клетками (44%) [5].В 20–25% случаев присутствуют плеоморфные или иммунобластные клетки типа Рида-Штернберга [6]. Представление может быть различным, при этом поражение ошибочно принимается за другие кожные заболевания, такие как экзема у взрослых, гангренозная пиодермия, морфея, локализованная склеродермия или плоскоклеточный рак [7].

Гистопатологически в PCALCL наблюдаются плотные скопления или узелки крупных опухолевых клеток CD30 +; более 75 процентов опухолевых клеток должны быть CD30 + для диагностики PCALCL. Опухолевые клетки CD30 + являются CD4 + и могут иметь потерю маркеров Т-клеток, таких как CD2, CD3 и CD5.Маркеры клеточной поверхности могут помочь отличить PCALCL от его первичного узлового аналога при вторичном кожном заболевании. Опухоли PCALCL чаще экспрессируют HECA-452, а не EMA, тогда как вторичное заболевание с большей вероятностью экспрессирует EMA, а не HECA-452 [1]. Системные лимфомы также чаще содержат транслокацию 𝑡 (2; 5), которая создает гибридный белок NPM-ALK (нуклеофозмин-анапластическая киназа лимфомы) [8, 9].

CD30 + анапластические крупноклеточные лимфомы обычно связаны с плохим прогнозом, когда они являются системными, хотя они имеют благоприятный прогноз, когда они ограничиваются кожей [4].Выживаемость CD30 + PCLCL составляет 95% через пять лет после постановки диагноза, и около 20% поражений регрессируют спонтанно [10]. Однако CD30-отрицательный PCLCL является гораздо более агрессивным новообразованием (хотя при макроскопическом обследовании он неотличим от CD30 + PCLCL) с 5-летней выживаемостью 15% [4]. Крайне важно отличать CD30 + PCLCL от первичных узловых LCL со вторичным поражением кожи, потому что пациенты со вторичным кожным заболеванием обычно имеют худший прогноз и нуждаются в более агрессивном лечении.Наличие дренирующих лимфатических узлов не влияет на прогноз. Нет никаких клинических различий в клинических проявлениях, течении или прогнозе между анапластическими и неанапластическими CD30 + LCL [4].

Стандартным лечением одиночных или локализованных поражений PCALCL является либо местное иссечение, либо лучевая терапия. Химиотерапия обычно назначается пациентам с системным поражением. Лечение пациентов только с поражением кожи и узлов является спорным, и некоторые практикующие врачи отдают предпочтение лучевой и химиотерапии для этих пациентов [1].

4. Заключение

Первичная кожная CD30-положительная крупная Т-клеточная лимфома может проявляться различными путями, но окончательно отличается от других кожных Т-клеточных лимфом по экспрессии антигена CD30 при иммуногистологическом окрашивании. Другие маркеры клеточной поверхности, такие как EMA и ALK1, помогают отличить CD30 + PCLCL от вторичных кожных CD30 + LCL, что влияет на прогноз и решение о добавлении химиотерапии в схему лечения.

Согласие

Письменное информированное согласие было получено от пациента на публикацию этого описания случая и любых сопутствующих изображений.Копия письменного согласия доступна для ознакомления главному редактору журнала.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что финансовая или нефинансовая поддержка не была получена, и что у них нет конкурирующих интересов.

Авторские права

Авторские права © 2011 Рехан Хуссейн и Амир Баджогли. Это статья в открытом доступе, распространяется под Лицензия Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.

Антитела к CD30 | Invitrogen

Антитела, обнаруживающие CD30, можно использовать в нескольких научных приложениях, включая проточную цитометрию, вестерн-блоттинг, иммуногистохимию (парафин), ELISA и иммуноцитохимию. Эти антитела нацелены на CD30 в образцах человека, мыши и крысы. Наши моноклональные, поликлональные и рекомбинантные моноклональные антитела к CD30 разработаны для мышей, кроликов, армянских хомяков и хомяков. Найдите антитело к CD30, соответствующее вашим потребностям.Выберите одно из 81 антител к CD30, которые были проверены в экспериментах с 18 публикациями и 266 изображениями, представленными в нашей галерее данных.

Просмотрите первичные антитела для WB, Flow, IHC, ICC / IF, ELISA, IP и других приложений. Антитела с данными расширенной проверки были проверены на специфичность, чтобы гарантировать, что антитело связывается с указанным антигеном. Если вы не можете найти нужное антитело, свяжитесь с нами сегодня, чтобы разработать индивидуальные антитела для конкретных целей, видов и приложений.Посмотреть больше

Информация о цели

CD30 (Ki-1, член суперсемейства рецепторов TNF 8) представляет собой трансмембранный гликопротеин типа I суперсемейства рецепторов TNF. CD30 был первоначально идентифицирован как поверхностный антиген клеток Ходжкина и Рида-Штернберга с использованием моноклонального антитела Ki-1. Лиганд для CD30 — CD30L (CD153). Связывание CD30 с CD30L опосредует плейотропные эффекты, включая пролиферацию, активацию, дифференцировку и апоптотическую гибель клеток.CD30 играет решающую роль в патофизиологии болезни Ходжкина и других CD30 + лимфом. CD30 действует как костимулирующая молекула при отрицательном отборе тимуса. Помимо экспрессии на клетках Ходжкина и Рида-Штернберга, CD30 также обнаруживается в некоторых неходжкинских лимфомах (включая лимфомы Беркитта), инфицированных вирусом Т- и В-клетках, а также на нормальных Т- и В-клетках после активации. В Т-клетках экспрессия CD30 присутствует в подгруппе Т-клеток, которые продуцируют цитокины Th3-типа, и на тимоцитах CD4 + / CD8 +, которые совместно экспрессируют CD45RO и рецептор IL4.Растворимая форма CD30 (sCD30) служит маркером, отражающим иммунный ответ Th3. TRAF2 и TRAF5 могут взаимодействовать с этим рецептором и опосредовать передачу сигнала, которая приводит к активации NF-kappaB. CD30 является положительным регулятором апоптоза, и было показано, что он ограничивает пролиферативный потенциал аутореактивных эффекторных Т-клеток CD8 и защищает организм от аутоиммунитета. Сообщалось о двух альтернативно сплайсированных вариантах транскрипта этого гена, кодирующих разные изоформы. CD30 экспрессируется мононуклеарными клетками в лимфоме Ходжкина, клетках Рида-Штернберга и большинстве анапластических крупноклеточных лимфом (ALCL).CD30 также экспрессируется эмбриональными карциномами.

Синонимы

Бер-h3; CD30; Антиген CD30; Молекула CD30; Рецептор CD30L; цитокиновый рецептор CD30; Ki-1 антиген; Антиген активации лимфоцитов CD30; sCD30; растворимый CD30; Член суперсемейства рецепторов фактора некроза опухолей 8; суперсемейство рецепторов фактора некроза опухолей, член 8

Функция CD30 на нормальных Т-клетках человека

Proc Amer Assoc Cancer Res, Volume 45, 2004

Abstract

4672

Предпосылки: CD30, член семейства рецепторов TNF, экспрессируется на многих типах лимфом, опухолях зародышевых клеток и множественной миеломе.Его лиганд, CD30-L (CD153), член семейства TNF, экспрессируется при хроническом лимфолейкозе, фолликулярной B-клеточной лимфоме, T-клеточной лимфобластной лимфоме и Т-клеточной лейкемии / лимфоме взрослых. CD30 может контролировать апоптоз, активацию клеток, эффекторную функцию и пролиферацию. Несмотря на его важную клиническую роль, функция CD30 недостаточно изучена. Вероятно, причина кроется в отсутствии хороших инструментов для анализа CD30. Чтобы подробно проанализировать функцию CD30 человека, мы попытались использовать человеческие Т-клетки.Однако в нестимулированных условиях немногие клетки экспрессируют CD30 в нормальных Т-клетках человека. Теперь мы сообщаем, что клетки CD45RO + T (памяти) при стимуляции с помощью OKT3 экспрессируют высокие уровни клеток CD30 +. С помощью клеток CD45RO + изучается функциональная роль CD30. Методы и результаты. Нормальные человеческие Т-клетки здоровых добровольцев были использованы для очистки CD45RO + Т-клеток с помощью магнитной сортировки, на данном этапе они являются CD30-отрицательными. После стимуляции OKT3, анти-CD28 и IL-15 или IL-2 40% клеток экспрессировали CD30.Клетки CD30 + и CD30- разделяли сортировкой клеток или магнитной сортировкой и сравнивали по фенотипу и функции. Фенотипически клетки CD30 + экспрессировали более высокие уровни CCR7, CD30-L, CD40 и CD40-L по сравнению с клетками CD30-. При стимуляции агонистическими антителами против CD30 C10 и OKT3 клетки CD30 + продуцировали значительно больше IL-5, IL-13 и IFN-γ по сравнению с клетками CD30-. Не было ни производства IL-4, ни разницы в IL-10. Что касается цитотоксической активности, как CD30 +, так и CD30- клетки обладали сходной цитотоксической активностью.Мы также обнаружили, что экспрессия CD30 была динамической. После сортировки CD30 мы повторно стимулировали CD30- клетки с помощью OKT3 и IL-15 и наблюдали, что значительное количество ранее отрицательных клеток стало CD30 +. Сравнение паттернов экспрессии генов между клеточной линией лимфомы CD30 + YT и нормальными человеческими Т-клетками с использованием микроматрицы кДНК выявит изменения в передаче сигналов CD30, которые могут быть специфичными для клеток лимфомы и могут способствовать онкогенной трансформации.

• Американская ассоциация исследований рака

Ее роль в биологии, диагностическом тестировании и таргетной терапии — гематология и онкология

Том 12, Выпуск 4, Дополнение 10 апреля 2014 г.

Эдуардо М.Сотомайор, MD

Сьюзан и Джон Сайкс, заведующий кафедрой гематологических злокачественных новообразований
Онкологический центр Моффит
Научный директор Института персонализированной медицины семьи ДеБартоло
Профессор кафедры онкологических наук, патологии и клеточной биологии
Медицинский колледж Университета Южной Флориды
Тампа, Флорида

Кен Х. Янг, MD, PhD

Доцент
Онкологический центр Андерсона Университета Техаса
Отделение гематопатологии
Хьюстон, Техас

Анас Юнес, MD

Руководитель службы лимфомы
Онкологический центр Memorial Sloan Kettering
New York, New York

Реферат: CD30, член суперсемейства рецепторов фактора некроза опухолей, представляет собой трансмембранный гликопротеиновый рецептор, состоящий из внеклеточного домена, трансмембранного домена и внутриклеточного домена.CD30 стал важной молекулой в области таргетной терапии, поскольку его экспрессия обычно ограничивается конкретными типами и состояниями заболеваний. Основные виды рака с повышенной экспрессией CD30 включают лимфому Ходжкина и анапластическую крупную Т-клеточную лимфому, и экспрессия CD30 считается важной для дифференциальной диагностики этих злокачественных новообразований. Чаще всего экспрессию CD30 выявляют и проводят иммуногистохимическим окрашиванием образцов биопсии. В качестве альтернативы, анализ проточной цитометрии также был разработан для аспирационных образцов свежих тканей и клеток, включая аспират периферической крови и костного мозга.За последние несколько лет было разработано несколько терапевтических агентов, нацеленных на CD30, с переменным успехом в клинических испытаниях. Значительный прогресс в нацеливании на CD30 был замечен с разработкой конъюгата антитело-лекарство брентуксимаб ведотин, который состоит из «голого» анти-CD30-антитела SGN-30, конъюгированного с синтетическим антитубулиновым агентом монометилауристатином E. В 2011 году брентуксимаб ведотин был одобрен Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США для использования при лимфоме Ходжкина и анапластической крупноклеточной лимфоме на основании данных клинических испытаний, показывающих высокую частоту ответа при этих показаниях.Текущие испытания изучают брентуксимаб ведотин после трансплантации аутологичных стволовых клеток, как часть комбинированных схем химиотерапии, и при других злокачественных новообразованиях, экспрессирующих CD30, включая первичные большие B-клеточные лимфомы средостения, диффузные большие B-клеточные лимфомы, лимфомы, положительные по вирусу Эпштейна-Барра. , периферическая Т-клеточная лимфома, не определенная иначе, и кожная анапластическая крупноклеточная лимфома.

Заявление об ограничении ответственности

Были приложены все усилия для обеспечения точного представления информации об употреблении наркотиков и другой информации; тем не менее, окончательная ответственность лежит на лечащем враче.Millennium Medical Publishing, Inc. и участники не несут ответственности за ошибки или любые последствия, возникшие в результате использования информации, содержащейся в данном документе. Читателям настоятельно рекомендуется обращаться к любой соответствующей первичной литературе. Никаких заявлений или одобрений в отношении каких-либо лекарств или соединений, находящихся в настоящее время в клинических исследованиях, не делается.

© 2014 Millennium Medical Publishing, Inc., 611 Broadway, Suite 310, New York, NY 10012. Напечатано в США. Все права защищены, включая право на воспроизведение, полностью или частично, в любой форме.

Биология и экспрессия CD30

Эдуардо М. Сотомайор, MD

Сьюзан и Джон Сайкс, заведующий кафедрой гематологических злокачественных новообразований
Онкологический центр Моффит
Научный директор Института персонализированной медицины семьи ДеБартоло
Профессор кафедры онкологических наук, патологии и клеточной биологии
Медицинский колледж Университета Южной Флориды
Тампа, Флорида

Биология рецептора CD30

CD30 является одним из нескольких членов суперсемейства рецепторов фактора некроза опухоли (TNFR). ¹ Подобно многим другим членам суперсемейства TNFR, CD30 представляет собой трансмембранный гликопротеиновый рецептор, состоящий из внеклеточного домена, трансмембранного домена и внутриклеточного домена. Внеклеточный домен CD30 содержит 6 участков аминокислот, богатых цистеином, которые помогают формировать каркас из дисульфидных связей, создавая удлиненную структуру. ² Внутриклеточный цитоплазматический хвостовой домен содержит несколько остатков серина / треонина, которые могут фосфорилироваться, создавая сайты стыковки для адаптерных белков для связывания и передачи сигналов в клетку. ³ Эти адаптерные белки могут включать TNFR-ассоциированные факторы (TRAF), а также ряд TRAF-связывающих белков. ⁴

Связывание лиганда CD30 (также называемого CD153 ) с CD30 вызывает тримеризацию и привлечение молекул, что приводит к активации сигнального пути. ³ Эти эффекты возникают, когда связывание лиганда передается через рецептор во внутриклеточную часть CD30, индуцируя связывание TRAF (в первую очередь TRAF2 и TRAF5), что затем приводит к активации сигнальных путей. ^5,6 Например, было продемонстрировано, что связывание лиганда CD30 с CD30 вызывает изменения в субклеточной локализации и уровнях TRAF2. В зависимости от конкретных клеточных условий и индуцированных сигнальных путей рецептор CD30 может запускать активацию пути митоген-активируемой протеинкиназы или ингибитора пути киназы κB / ядерного фактора κB (NF-κB). ^3,7,8

CD30 может приводить к ряду плейотропных эффектов, приводящих к пролиферации, дифференцировке или выживанию, в зависимости от типа клетки, состояния активации и статуса трансформации, а также от конкретного инициируемого сигнального пути. ³ Молекулярные механизмы, ответственные за эти дифференциальные эффекты, полностью не поняты, и потенциал для зависимых от ситуации и клеточного типа плейотропных эффектов является другой характеристикой, которую CD30 и его лиганд имеют общие с другими членами семейства TNFR. Важно отметить, что некоторые из этих различий могут быть опосредованы тем, как рецептор CD30 активируется в различных клетках. Например, индукция передачи сигнала CD30 с помощью анти-CD30-антитела в клеточной линии анапластической большой Т-клеточной лимфомы (ALCL) связана с апоптозом, тогда как то же самое антитело индуцирует пролиферацию в клеточных линиях лимфомы Ходжкина. ⁹ Одним из важных различий между этими клетками, которое может объяснить эти противоположные эффекты, является конститутивная экспрессия NF-κB в клеточных линиях лимфомы Ходжкина.

Внеклеточная часть CD30 подвергается ферментативному расщеплению металлопротеазами, что приводит к высвобождению растворимого CD30 массой 85 кДа в сыворотке и / или жидкостях организма. ¹⁰ Несколько исследований теперь продемонстрировали, что уровни растворимого CD30 коррелируют с активностью заболевания в некоторых случаях аутоиммунных заболеваний и могут быть связаны со степенью опухолевой нагрузки при некоторых злокачественных новообразованиях. ^11-14 Считается, что высокие уровни растворимого CD30 в сыворотке могут служить независимым предиктором прогрессирования заболевания и плохого прогноза у пациентов с CD30-положительными лимфомами.

Экспрессия CD30 в нормальных и патологических состояниях

В целом, CD30 экспрессируется только в ограниченной степени в здоровых тканях и клетках. ^15,16 Сообщалось об экспрессии CD30 во время раннего развития плода человека. ¹⁷ В период между 8 и 10 неделями развития плода CD30 экспрессируется во всех тканях плода, происходящих из всех
3 зародышевых листков, включая желудочно-кишечный тракт, специальные железы заглоточной передней кишки и мочевыводящие, опорно-двигательные, репродуктивные, нервные и нервные клетки. и эндокринные системы.К 10-й неделе развития плода экспрессия CD30 может быть обнаружена в коже и гематолимфоидной системе (особенно в тимусе). Однако после 12-й недели беременности экспрессия CD30 становится гораздо более ограниченной, в первую очередь гематолимфоидной системой. В течение всего периода раннего развития плода экспрессия CD30 не наблюдается ни в дыхательной, ни в сердечно-сосудистой системах. Эта строгая регуляция экспрессии CD30 во время раннего развития плода предполагает наличие генетических или эпигенетических механизмов, ответственных за подавление экспрессии гена, кодирующего CD30.

В здоровых тканях взрослых незначительная экспрессия CD30 может наблюдаться в некоторых покоящихся клетках и тканях, включая клетки лимфатических узлов, миндалин и тимуса, а также в децидуальных клетках матки и клетках эндометрия. ^3,18 Имеются также некоторые свидетельства низкого уровня экспрессии CD30 в небольшом проценте покоящихся CD8-положительных Т-клеток. ^3,19 Однако большая часть экспрессии CD30 в здоровых тканях взрослого человека обычно ограничивается активированными В-клетками, Т-клетками и естественными клетками-киллерами (NK).Доля активированных лимфоцитов, которые являются CD30-положительными, составляет менее 1% от циркулирующих клеток в крови. ¹⁵

Вирусная инфекция может индуцировать экспрессию CD30 как на Т-клетках, так и на В-клетках. ¹⁶ Действительно, ассоциация вирусной трансформации с экспрессией CD30 на лимфоцитах периферической крови привела к более глубокому пониманию роли CD30 как молекулы активации. ¹⁸ Процент CD30-позитивных активированных клеток периферической крови может варьироваться от менее 0.От 1% на исходном уровне до 95% через 3 дня после вирусной инфекции. ¹⁶ Несколько вирусов вовлечены в индукцию экспрессии CD30, включая вирус Эпштейна-Барра и человеческий Т-клеточный лимфотропный вирус типа I или II. ^15,20,21 В CD4-положительных Т-клетках, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), активация CD30 может обеспечивать механизм обратной связи, поддерживающий усиленное производство вируса, через индукцию TRAF2 NF-κB. ²²

Растворимый CD30 был обнаружен в сыворотках пациентов, инфицированных вирусом Эпштейна-Барра, вирусом гепатита В, вирусом гепатита С и ВИЧ. ^{23-25 ​​} Уровни циркулирующего растворимого CD30 могут коррелировать с активностью заболевания у ВИЧ-инфицированных пациентов, при этом высокие уровни считаются независимым предиктором прогрессирования заболевания и плохим прогнозом. ²⁶ То же самое было предложено для пациентов с хронической инфекцией гепатита B. ^27,28

Было также обнаружено, что несколько аутоиммунных и воспалительных заболеваний связаны с сильно повышенными уровнями экспрессии CD30 как на поверхности активированных клеток, так и в растворимой форме молекулы.Высокая экспрессия CD30 особенно очевидна в периоды повышенной активности заболевания или в острых фазах заболевания. ¹² Как и при вирусных инфекциях, высокий уровень растворимого CD30 в сыворотке этих пациентов указывает на прогрессирование заболевания и плохой прогноз. ³ Аутоиммунные и воспалительные заболевания, демонстрирующие повышенную экспрессию CD30, включают ревматоидный артрит, первичный прогрессирующий рассеянный склероз, локализованную склеродермию, системную красную волчанку, атопический дерматит, астму и аллергический ринит. ^3,29-31 Ассоциация CD30 с аутоиммунными и воспалительными заболеваниями может быть связана с его высокой экспрессией в Т-клетках с провоспалительным фенотипом.

CD30 также может играть роль в развитии болезни «трансплантат против хозяина». Ингибирование CD30 связано с уменьшением числа случаев болезни «трансплантат против хозяина», наблюдение, которое привело к исследованию использования антител к CD30 как средства предотвращения этого состояния. ³²

Экспрессия CD30 в злокачественных клетках

Безусловно, наиболее заметной степенью повышенной экспрессии CD30 в пораженной ткани являются злокачественные новообразования.Основными злокачественными новообразованиями с повышенной экспрессией CD30 являются лимфома Ходжкина и ALCL (рис. 1). CD30 был впервые идентифицирован как антиген, специфичный к клеткам Рида-Штернберга лимфомы Ходжкина, признак, который впоследствии был обнаружен как общий для крупных неопластических клеток ALCL. ^15,33-35 Более поздние исследования сообщили об экспрессии CD30 более чем в 95% случаев классической лимфомы Ходжкина. ³⁶ По определению, все случаи ALCL являются CD30-положительными. ^37,38

В дополнение к повышенной экспрессии CD30, очевидной при лимфоме Ходжкина и ALCL, многочисленные сообщения идентифицировали вариабельную экспрессию CD30 при других злокачественных новообразованиях.Однако, похоже, что в подавляющем большинстве этих случаев экспрессия молекулы CD30 происходит с гораздо меньшей частотой и / или на более низком уровне. Например, существует вариабельная экспрессия CD30 в различных Т-клеточных лимфомах; в целом, экспрессия CD30 наблюдается примерно в 30% Т-клеточных злокачественных новообразований (рис. 2). ³⁹ Приблизительно от 32% до 52% пациентов с периферической Т-клеточной лимфомой, не указанных иным образом, обнаруживают экспрессию CD30. ^40,41 Т-клеточная лимфома, связанная с энтеропатией, также демонстрирует относительно высокую экспрессию CD30. ^42,43

В целом сообщается, что от 15% до 20% злокачественных новообразований В-клеток являются CD30-положительными (рис. 2 [E и F]). ⁴⁴ Экспрессия CD30 наблюдается в 26% случаев диффузных больших В-клеточных лимфом, хотя более свежие сообщения предполагают, что на самом деле этот показатель может быть ниже. ⁴⁵ Важно отметить, что среди пожилых пациентов с диффузной В-крупноклеточной лимфомой экспрессия CD30 часто связана с вирусом Эпштейна-Барра. ⁴⁶ Эта корреляция была показана в перуанском ретроспективном обзоре случаев пожилых EBV-положительных пациентов с диффузной большой B-клеточной лимфомой, который показал, что экспрессия CD30 достигает 70–80%. ⁴⁷

CD30 также экспрессируется в солидных опухолях, хотя и с гораздо меньшей частотой по сравнению с опухолями кроветворного происхождения. Высокая экспрессия CD30 наблюдается при эмбриональной карциноме яичка и опухолях половых клеток. ^18,48,49 Фактически, CD30 является частью диагностической панели для эмбриональной карциномы яичка. К другим солидным опухолям, в которых CD30 сообщалось реже, относятся рак яичников (5%), рак эндометрия (3%) и рак легких (3%). ⁵⁰ Интересно, что до 14% плоскоклеточных карцином кожи могут иметь экспрессию CD30, как и примерно 10% карцином носоглотки. ⁵⁰

Механизмы, вызывающие повышенную экспрессию CD30

Обычно наивные Т-клетки активируются в ответ на свое первое воздействие родственного антигена. В лабораторных экспериментах in vitro активация может быть достигнута с помощью комбинации анти-CD3 и анти-CD28 антител. CD30 временно экспрессируется в этих Т-клетках после этой первичной активации. Экспрессия интерлейкина 4 (IL-4)
и CD28 необходима для индукции экспрессии CD30. ⁵¹ Эта потребность в IL-4 может объяснять высокую экспрессию CD30 в T-helper-2 клетках, индукция которых зависит от IL-4. При втором воздействии родственного антигена экспрессия CD30 становится более стабильной, что позволяет предположить, что постоянная экспрессия этой молекулы может быть важной для формирования памяти Т-клеток. Эта теория подтверждается исследованиями на мышах с дефицитом CD30, у которых отсутствуют функциональные клетки памяти CD4. ⁵² Следует отметить, что CD30 также способствует поляризации Th27. ⁵³ Этот эффект подчеркивает дихотомию, приписываемую CD30, в том смысле, что Th27 является провоспалительным, тогда как Th3-клетки продуцируют иммуносупрессивные цитокины.

На молекулярном уровне промотор гена CD30 содержит несколько сайтов связывания для факторов транскрипции, таких как Sp1 и STAT3. ⁵⁴ Было показано, что в клеточных линиях лимфомы Ходжкина и ALCL экспрессия CD30 регулируется фактором транскрипции JunB. ^55,56 Ген CD30, по-видимому, также подлежит эпигенетической регуляции, поскольку его промотор включает области, известные как CpG-островки. В клеточных линиях лимфомы Ходжкина и ALCL эти CpG-островки демонстрируют отчетливое гипометилирование, ⁵⁷ , что приводит к повышенной экспрессии транскрипта CD30 и последующим более высоким уровням белка CD30.Напротив, в некоторых опухолях обнаружено гиперметилирование CpG-островков с последующим подавлением транскрипции гена CD30. Важно отметить, что этот механизм подавления гена может быть направлен на ингибирование гипометилирующими агентами, такими как азацитидин или децитабин, или пан-селективными или изотип-селективными ингибиторами гистондеацетилазы. ⁵⁷ Следовательно, вероятно, что эти эпигенетические модификаторы могут обеспечить способ индуцировать повышенную экспрессию CD30 в злокачественных клетках, которые обычно не экспрессируют этот белок клеточной мембраны.Использование комбинации эпигенетических модификаторов для увеличения экспрессии CD30 потенциально могло бы расширить использование агентов, нацеленных на CD30, за счет включения этих видов рака. Следует отметить, что в одном недавнем исследовании аскорбиновая кислота использовалась для индукции гипометилирования гена CD30 , что привело к увеличению экспрессии CD30. ⁵⁸

Благодарность

Д-р Сотомайор является докладчиком программы SOLAR и участвовал в работе консультативных советов, спонсируемых Seattle Genetics.

Список литературы

1. Smith CA, Gruss HJ, Davis T. et al. Антиген CD30, маркер лимфомы Ходжкина, представляет собой рецептор, лиганд которого определяет новое семейство цитокинов, гомологичных TNF. Ячейка. 1993; 73 (7): 1349-1360.

2. Dürkop H, Latza U, Hummel M, Eitelbach F, Seed B, Stein H. Молекулярное клонирование и экспрессия нового члена семейства рецепторов фактора роста нервов, которые характерны для болезни Ходжкина. Ячейка., 1992; 68 (3): 421-427.

3. Офлазоглу Э., Гревал И.С., Гербер Х. Нацеливание на CD30 / CD30L в онкологии и аутоиммунных и воспалительных заболеваниях. В кн .: Гревал И.С., под ред. Терапевтические мишени суперсемейства TNF . Нью-Йорк, Нью-Йорк: Спрингер; 2009: 174–185.

4. Дэн С., Пан Б., О’Коннор О.А. Брентуксимаб ведотин. Clin Cancer Res. 2013; 19 (1): 22-27.

5. Duckett CS, Thompson CB. CD30-зависимая деградация TRAF2: влияние на негативную регуляцию передачи сигналов TRAF и контроль выживаемости клеток. Genes Dev . 1997; 11 (21): 2810-2821.

6. Айзава С., Накано Х., Исида Т. и др. Фактор, связанный с рецептором фактора некроза опухоли (TRAF) 5 и TRAF2, вовлечены в опосредованную CD30 активацию NFkappaB. J. Biol Chem. 1997; 272 (4): 2042-2045.

7. Дакетт С.С., Гедрих Р.В., Гилфиллан М.С., Томпсон С.Б. Индукция ядерного фактора каппаВ рецептором CD30 опосредуется TRAF1 и TRAF2. Mol Cell Biol. 1997; 17 (3): 1535-1542.

8. Хори Р., Айзава С., Нагаи М. и др.Новый домен в цитоплазматическом хвосте CD30 опосредует активацию NFkappaB. Инт Иммунол . 1998; 10 (2): 203-210.

9. Мир СС, Рихтер Б.В., Дакетт К.С. Дифференциальные эффекты активации CD30 в клетках анапластической крупноклеточной лимфомы и болезни Ходжкина. Кровь . 2000; 96 (13): 4307-4312.

10. Josimovic-Alasevic O, Dürkop H, Schwarting R, Backé E, Stein H, Diamantstein T. Антиген Ki-1 (CD30) высвобождается Ki-1-положительными опухолевыми клетками in vitro и in vivo. I. Частичная характеристика растворимого антигена Ki-1 и обнаружение антигена в супернатантах клеточных культур и в сыворотке с помощью иммуноферментного анализа. Eur J Immunol. 1989; 19 (1): 157-162.

11. Gerber H-P. Новые методы иммунотерапии, направленные на CD30 при лимфоме Ходжкина. Биохим Фармакол . 2010; 79 (11): 1544-1552.

12. Chiarle R, Podda A, Prolla G, Gong J, Thorbecke GJ, Inghirami G. CD30 в нормальных и опухолевых клетках. Клин Иммунол . 1999; 90 (2): 157-164.

13. Holzer G, Pfandlsteiner T, Blahovec H, Trieb K, Kotz R. Сывороточные концентрации sCD30 и sCD40L у пациентов со злокачественными опухолями костей. Wien Med Wochenschr. 2003; 153 (1-2): 40-42.

14. Дил В., Болен Х., Вольф Дж. CD30: цитокиновый рецептор, маркер дифференцировки или молекула-мишень для специфического иммунного ответа? Энн Онкол . 1994; 5 (4): 300-302.

15. Stein H, Mason DY, Gerdes J, et al. Экспрессия антигена Ki-1, ассоциированного с болезнью Ходжкина, в реактивной и неопластической лимфоидной ткани: свидетельство того, что клетки Рида-Штернберга и гистиоцитарные злокачественные новообразования происходят из активированных лимфоидных клеток. Кровь. 1985; 66 (4): 848-858.

16. Фалини Б., Пилери С., Пиццоло Г. и др. Молекула CD30 (Ki-1): новый цитокиновый рецептор суперсемейства рецепторов фактора некроза опухоли как инструмент для диагностики и иммунотерапии. Кровь. 1995; 85 (1): 1-14.

17. Тамиолакис Д., Пападопулос Н., Ламбропулу М. и др. Иммуногистохимическое окрашивание тканей плода человека на Ber-h3 (CD30). Int J Biol Sci. 2005; 1 (4): 135-140.

18. Dürkop H, Foss H-D, Eitelbach F, et al.Экспрессия антигена CD30 в нелимфоидных тканях и клетках. J Pathol. 2000; 190 (5): 613-618.

19. Агравал Б., Реддиш М., Лонгенекер Б.М. Экспрессия CD30 на человеческих CD8 + Т-клетках, выделенных из лимфоцитов периферической крови нормальных доноров. J Immunol. 1996; 157 (8): 3229-3234.

20. Abbondanzo SL, Sato N, Straus SE, Jaffe ES. Острый инфекционный мононуклеоз: экспрессия антигена CD30 (Ki-1) и гистологические корреляции. Am J Clin Pathol. 1990; 93 (5): 698-702.

21. Herbst H, Stein H. Опухолевые вирусы в CD30-положительных анапластических крупноклеточных лимфомах. Лимфома лейк . 1993; 9 (4-5): 321-328.

22. Цициков Е.Н., Райт Д.А., Геха Р.С. Индукция CD30 транскрипции гена вируса иммунодефицита человека опосредуется TRAF2. Proc Natl Acad Sci U S A . 1997; 94 (4): 1390-1395.

23. Юнес А., Кадин М.Е. Новые применения семейства лигандов и рецепторов фактора некроза опухолей в терапии рака. J Clin Oncol. 2003; 21 (18): 3526-3534.

24. Юнес А., Аггарвол BB. Клинические последствия семейства факторов некроза опухолей при доброкачественных и злокачественных гематологических нарушениях. Рак. 2003; 98 (3): 458-467.

25. Пиццоло Дж., Винанте Ф., Надали Дж. И др. Высокий уровень растворимого CD30 в сыворотке при острой первичной инфекции ВИЧ-1. Clin Exp Immunol. 1997; 108 (2): 251-253.

26. Rizzardi GP, Barcellini W, Tambussi G, et al. Уровни в плазме растворимого CD30, фактора некроза опухоли (TNF) -альфа и рецепторов TNF во время первичной инфекции ВИЧ-1: корреляция с РНК ВИЧ-1 и клинический исход. СПИД. 1996; 10 (13): F45-F50.

27. Фаттович Г., Винанте Ф., Джустина Г. и др. Уровни растворимого CD30 в сыворотке крови при хронической инфекции вируса гепатита В. Clin Exp Immunol. 1996; 103 (1): 105-110.

28. Монсальве-де-Кастильо Ф, Ромеро Т.А., Эстевес Дж. И др. Концентрации цитокинов, растворимого рецептора интерлейкина-2 и растворимого CD30 в сыворотках пациентов с инфекцией вируса гепатита В во время острой фазы и фазы выздоровления. Clin Diagn Lab Immunol .2002; 9 (6): 1372-1375.

29. Герли Р., Мускат С., Бистони О. и др. Высокие уровни растворимой формы молекулы CD30 при ревматоидном артрите (РА) являются выражением поражения CD30 + Т-клеток в воспаленных суставах. Клин Эксперимент Иммунол . 1995; 102 (3): 547-550.

30. Ihn H, Yazawa N, Kubo M, et al. Уровни циркулирующего растворимого CD30 увеличиваются у пациентов с локализованной склеродермией и коррелируют с серологическими и клиническими особенностями заболевания. Дж. Ревматол .2000; 27 (3): 698-702.

31. Макмиллан С.А., Макдоннелл Г.В., Дуглас Дж. П., Хокинс С.А. Оценка клинической применимости показателей спинномозговой жидкости (CSF) воспалительных маркеров при рассеянном склерозе. Acta Neurol Scand . 2000; 101 (4): 239-243.

32. Chen YB, McDonough S, Hasserjian R et al. Экспрессия CD30 у пациентов с острой реакцией «трансплантат против хозяина». Кровь . 2012; 120 (3): 691-696.

33. Schwab U, Stein H, Gerdes J, et al. Производство моноклональных антител, специфичных к клеткам Ходжкина и Штернберга-Рида болезни Ходжкина и подмножеству нормальных лимфоидных клеток. Природа . 1982; 299 (5878): 65-67.

34. Stein H, Gerdes J, Schwab U, et al. Идентификация клеток Ходжкина и Штернберга-Рида как уникального типа клеток, полученных из недавно обнаруженной популяции мелких клеток. Int J Cancer. 1982; 30 (4): 445-459.

35. Stein H, Foss H-D, Dürkop H, et al. CD30 + анапластическая крупноклеточная лимфома: обзор ее гистопатологических, генетических и клинических особенностей. Кровь. 2000; 96 (12): 3681-3695.

36. von Wasielewski R, Mengel M, Fischer R, et al.Классическая болезнь Ходжкина: клиническое влияние иммунофенотипа. Ам Дж. Патол . 1997; 151 (4): 1123-1130.

37. Delsol G, Jaffe ES, Falini B и др. Анапластическая крупноклеточная лимфома (ALCL), ALK-положительная. В: Swerdlow SH, Campo E, Harris NL, et al, eds. Классификация опухолей кроветворной и лимфоидной тканей ВОЗ . 4-е изд. Лион, Франция: МАИР; 2008: 312-316.

38. Мейсон Д. Ю., Харрис Н. Л., Делсол Г. и др. Анапластическая крупноклеточная лимфома, ALK-отрицательная.В: Swerdlow SH, Campo E, Harris NL, et al, eds. Классификация опухолей кроветворной и лимфоидной тканей ВОЗ . 4-е изд. Лион, Франция: МАИР; 2008: 317-319.

39. Ли С.С., Рюдигер Т., Оденвальд Т., Рот С., Старостик П., Мюллер-Хермелинк Х.К. Ангиоиммунобластная Т-клеточная лимфома происходит из зрелых Т-хелперных клеток с различной экспрессией и потерей детектируемого CD4. Int J Cancer. 2003; 103 (1): 12-20.

40. Вайзенбургер Д.Д., Сэвидж К.Дж., Харрис Н.Л. и др .; Международный проект по периферической Т-клеточной лимфоме.Периферическая Т-клеточная лимфома, если не указано иное: отчет о 340 случаях из Международного проекта по периферической Т-клеточной лимфоме. Кровь . 2011; 117 (12): 3402-3408.

41. Sabattini E, Pizzi M, Tabanelli V, et al. Экспрессия CD30 в периферических Т-клеточных лимфомах. Haematologica . 2013; 98 (8): e81-e82.

42. Мюррей А., Куэвас Е.С., Джонс Д.Б., Райт Д.Х. Изучение иммуногистохимии и клональности Т-клеток Т-клеточной лимфомы, ассоциированной с энтеропатией. Ам Дж. Патол .1995; 146 (2): 509-519.

43. Delabie J, Holte H, Vose JM, et al. Связанная с энтеропатией Т-клеточная лимфома: клинические и гистологические данные Международного проекта по периферической Т-клеточной лимфоме. Кровь. 2011; 118 (1): 148-155.

44. Эоу Г.И., Ким Л.Х., Пе С.К. Характер экспрессии CD15, CD30 и Bcl-2 в диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфоме. Med J Malaysia. , 2006; 61 (4): 416-421.

45. Паллесен Г. Диагностическое значение антигена CD30 (Ki-1). Гистопатология. 1990; 16 (4): 409-413.

46. Хорошо CY, Папатомас Т.Г., Медейрос Л.Дж., Янг К.Х. ВЭБ-положительная диффузная В-крупноклеточная лимфома пожилых людей. Кровь. 2013; 122 (3): 328-340.

47. Белтран Б.Е., Кастильо Дж. Дж., Моралес Д. и др. ВЭБ-положительная диффузная В-крупноклеточная лимфома пожилых людей: серия случаев из Перу. Am J Hematol. 2011; 86 (8): 663-667.

48. Latza U, Foss H-D, Dürkop H, et al. Антиген CD30 при эмбриональной карциноме и эмбриогенезе и высвобождение растворимой молекулы. Ам Дж. Патол . 1995; 146 (2): 463-471.

49. Гопалан А., Дхалл Д., Олгак С. и др. Смешанные герминогенные опухоли яичек: морфологическое и иммуногистохимическое исследование с использованием маркеров стволовых клеток, OCT3 / 4, SOX2 и GDF3, с акцентом на морфологически трудно классифицируемые области. Мод Pathol . 2009; 22 (8): 1066-1074.

50. Шарман Дж. П., Гольдшмидт Дж. Х., Берк Дж. М. и др. Экспрессия CD30 при нелимфоматозных злокачественных новообразованиях [аннотация ASCO 3069]. Дж. Клин Онкол .2012; 30 (18 доп.).

51. Гилфиллан М.С., Ноэль П.Дж., Подак Э.Р., Райнер С.Л., Томпсон С.Б. Экспрессия костимулирующего рецептора CD30 регулируется как CD28, так и цитокинами. J Immunol. 1998; 160 (5): 2180-2187.

52. Гаспал FM, Ким М.Ю., МакКоннелл FM, Райкундалия С., Бекиарис В., Лейн П.Дж. У мышей, дефицитных по сигналам OX40 и CD30, отсутствует иммунный ответ памяти из-за недостаточной памяти Т-лимфоцитов CD4. Дж. Иммунол . 2005; 174 (7): 3891-3896.

53. Sun X, Yamada H, Shibata K, et al.Лиганд CD30 / CD30 играет критическую роль в дифференцировке Th27 у мышей. Дж. Иммунол . 2010; 185 (4): 2222-2230.

54. Croager EJ, Gout AM, Abraham LJ. Участие Sp1 и микросателлитных репрессорных последовательностей в контроле транскрипции человеческого гена CD30. Ам Дж. Патол . 2000; 156 (5): 1723-1731.

55. Ватанабе М., Огава Ю., Ито К. и др. AP-1 опосредовано ослабление репрессивной активности микросателлита промотора CD30 в клетках Ходжкина и Рида-Штернберга. Ам Дж. Патол . 2003; 163 (2): 633-641.

56. Hsu FY, Johnston PB, Burke KA, Zhao Y. Экспрессия CD30 в анапластической крупноклеточной лимфоме регулируется уровнем JunB, опосредованным нуклеофозмин-анапластической киназой лимфомы, специфическим для типа клеток образом. Cancer Res . 2006; 66 (18): 9002-9008.

57. Watanabe M, Ogawa Y, Itoh K, et al. Гипометилирование CpG-островков CD30 с аберрантной экспрессией JunB запускает индукцию CD30 при лимфоме Ходжкина и анапластической крупноклеточной лимфоме. Лаборатория Инвест . 2008; 88 (1): 48-57.

58. Chung TL, Turner JP, Thaker NY, et al. Аскорбат способствует эпигенетической активации CD30 в эмбриональных стволовых клетках человека. Стволовые клетки . 2010; 28 (10): 1782-1793.

CD30 Диагностика и тестирование

Кен Х. Янг, MD, PhD

Доцент
Онкологический центр Андерсона Университета Техаса
Отделение гематопатологии
Хьюстон, Техас

Инструменты для обнаружения экспрессии CD30

CD30 высоко экспрессируется определенными злокачественными клетками, но почти не экспрессируется многими нормальными клетками.Следовательно, экспрессия CD30 может использоваться для диагностики и в качестве высокоспецифичной мишени для лечения. Существует несколько способов оценки экспрессии CD30. Выбор метода в первую очередь зависит от типа образца. В современной гистопатологической практике наиболее распространенным типом образца, используемым для экспрессии CD30, является исследование фиксированной формалином залитой парафином опухолевой ткани, хотя свежезамороженная ткань также может использоваться в отдельных случаях. Качество окрашивания CD30 часто коррелирует с качеством образца биопсии, независимо от того, является ли это биопсией стержневой иглой, тонкоигольной аспирацией или эксцизионной биопсией.В целом, патологи предпочитают иметь больший объем биопсированной ткани, чтобы можно было более точно оценить экспрессию и интенсивность CD30 среди опухолевых клеток. ^1,2

CD30 обычно определяется иммуногистохимическим окрашиванием в повседневной патологической практике. Недавно был разработан подход проточной цитометрии для образцов периферической крови, костного мозга и биологических жидкостей, поскольку теперь существуют антитела к CD30, совместимые с этим методом. Иммуноферментный анализ (ELISA) также полезен для измерения уровней экспрессии растворимого CD30.Сравнение иммуногистохимии с проточной цитометрией показало, что эти 2 метода хорошо коррелировали для обнаружения экспрессии CD30 на клетках лимфомы и лейкемии. ^3,4 Таблица 1 суммирует полезность, плюсы и минусы этих методов обнаружения CD30. Иммуногистохимия сочетает в себе преимущество экспрессии антигена с морфологическими особенностями опухолевых клеток, облегчая диагностику и классификацию. Это метод, наиболее часто используемый практикующими патологами и врачами. Однако качество иммуногистохимического окрашивания во многом зависит от методов обращения с тканями и их обработки.На интерпретацию результатов существенно влияет процесс фиксации ткани, включая продолжительность фиксации, тип фиксаторов, извлечение антигена, процедуру окрашивания антител и качество ткани, а также наличие любых артефактов раздавливания или некротических изменений. Дальнейшее улучшение стандартизации окрашивания позволит оптимизировать иммуногистохимию для патологической практики.

Проточная цитометрия становится все более мощным подходом к обнаружению CD30 в клинической практике, особенно при гематологических злокачественных новообразованиях, поскольку образцы крови и костного мозга легко получить.При биопсии солидных тканей использование проточной цитометрии определяется наличием свежей ткани. Доступность небольшого количества ткани для биопсии будет иметь приоритет перед рутинной гистопатологической оценкой перед анализом проточной цитометрии. Поэтому во многих клинических сценариях проточная цитометрия выбирается, когда доступные образцы состоят из крови, костного мозга или биологических жидкостей. В дополнение к своей высокой эффективности и меньшему времени обработки, проточная цитометрия также предлагает преимущества лучшей стандартизации и высокой чувствительности для идентификации пациентов со слабой экспрессией CD30 клеток.Современная технология многоцветной проточной цитометрии обеспечивает мощный метод анализа антигенного профиля как в клинических, так и в исследовательских целях.

В настоящее время существует 5 различных типов моноклональных антител к CD30, которые обычно используются для диагностики CD30. Они обозначаются Ki-1, Ber-h3, Ber-h5, Ber-H6 и Ber-H8. Антитело Ber-h3 наиболее совместимо со свежезамороженной тканью, и все 5 из этих антител хорошо работают с фиксированной формалином тканью, залитой парафином. В США Ki-1 и Ber-h3 наиболее широко используются в иммуногистохимии; эти 2 антитела распознают разные эпитопы внеклеточного домена CD30.При иммуногистохимии типичный образец окрашивания CD30 представлен сильным окрашиванием клеточной мембраны в сочетании со слабым окрашиванием цитоплазмы. Окрашивание цитоплазмы, вероятно, вызвано распознаванием белка-предшественника CD30 в аппарате Гольджи.

Как упоминалось ранее, мембраносвязанный CD30 может расщепляться с образованием растворимой формы молекулы. Повышенные уровни растворимого CD30 в сыворотке наблюдались при различных патологических состояниях. Есть некоторые свидетельства того, что высокие уровни растворимого CD30 коррелируют с опухолевым бременем, плохим прогнозом и активностью заболевания, и поэтому CD30 может иметь некоторое прогностическое значение при некоторых видах рака, таких как лимфома Ходжкина и ALCL.Кроме того, растворимый CD30 был идентифицирован при различных аутоиммунных заболеваниях, включая ревматоидный артрит, системную красную волчанку, системный склероз, атопический дерматит, болезнь Грейвса, тиреоидит Хашимото, гранулематоз Вегенера и синдром Оменна.

В рутинной патологической практике метод иммуногистохимии обеспечивает достаточную и надежную поддержку во время диагностического обследования, и он более рентабелен по сравнению с проточной цитометрией. Метод ELISA использовался для обнаружения растворимого CD30, уровень которого повышен у пациентов с онкологическими и аутоиммунными заболеваниями.Однако результаты ELISA могут быть ненадежными, и его использование в качестве диагностического и прогностического биомаркера требует дальнейшего изучения.

Проблемы обеспечения качества

Существует несколько способов обеспечения контроля качества при тестировании на CD30, независимо от того, используется ли иммуногистохимическое окрашивание или проточная цитометрия. Самая важная из этих мер связана с обращением с образцами тканей. Для иммуногистохимии требуются надежные положительные и отрицательные контроли, а также использование оптимального метода поиска антигена.В проточной цитометрии решающее значение имеют стратегия гейтирования и популяция клеток. Другие важные факторы включают преаналитические компоненты, такие как использование соответствующих реагентов, равновесие прибора и калибровку с использованием процедур окрашивания чернил, а также навыки технического специалиста.

Проблемы для тестирования экспрессии CD30

Безусловно, наиболее серьезная проблема для получения правильных результатов при тестировании на CD30 возникает из самого образца биопсии, включая тип используемой ткани, размер образца, наличие некроза и используемый метод фиксации. ⁵ Артефакты окрашивания могут возникать, если фиксация задерживается, объем или время фиксации недостаточны, или если тканевой блок слишком велик. Другой проблемой, связанной с иммуногистохимическим окрашиванием CD30, является определение типа используемого антитела к CD30 и конкретной процедуры окрашивания, которую необходимо соблюдать. Важно выбрать соответствующий контроль и метод поиска антигена. Кроме того, необходимо априори определить, как будет оцениваться паттерн экспрессии CD30, в том числе будет ли он представлен в процентах (от каких клеток) и / или как об интенсивности экспрессии среди опухолевых клеток.

Если в качестве метода выбора для тестирования экспрессии CD30 выбрана проточная цитометрия, необходимо правильно выбрать такие параметры, как стратегия гейтирования и анализируемая популяция клеток. Также необходимо знать характер реактивности антител, ожидаемый в выбранных нормальных лимфоидных клетках и фоновых неопухолевых клетках.

Когда следует проводить тестирование CD30

Был идентифицирован ряд гематологических злокачественных новообразований, при которых тестирование экспрессии CD30 может оказаться полезным для диагностики, дифференциальной диагностики и стратификации риска. ⁶ Лимфома Ходжкина и ALCL — это 2 формы лимфомы, при которых экспрессия CD30 присутствует почти у всех пациентов. Экспрессия CD30 наблюдается у 98% пациентов с классической лимфомой Ходжкина. ⁷ Экспрессия CD30 считается диагностически важной для ALCL. Окрашивание CD30 составляет важную часть дифференциальной диагностики как лимфомы Ходжкина, так и ALCL. Например, лимфома Ходжкина является CD30-положительной и CD15-положительной, но отрицательной для LCA, CD3, TIA-1 и EMA.Напротив, ALCL является положительным для CD30 и отрицательным для CD15, но положительным для LCA, пан-Т-клеточных антигенов (вариабельный), TIA-1 и EMA; в некоторых случаях он также является положительным для киназы анапластической лимфомы (ALK). При совместном использовании эти биомаркеры могут предоставить информацию для точной дифференциальной диагностики этих лимфоидных злокачественных новообразований в повседневной патологической практике. Несколько исследований показали, что по многим подтипам лимфомы согласие экспертов-патологов относительно низкое. ^8,9 Исследование, проведенное Международным проектом по Т-клеточной лимфоме, показало, что от 10% до 20% диагнозов были неверными из-за отсутствия конкретных диагностических биомаркеров. ⁸ В условиях ALK-положительной ALCL, NK-клеточной лимфомы и Т-клеточного лейкоза взрослых точность и надежность относительно выше благодаря наличию уникальных иммуногистохимических биомаркеров. Предполагается, что экспертная оценка патологии для достижения диагностического консенсуса должна считаться стандартом лечения. ^8,9 Кроме того, срочно необходимы более совершенные и более специфические диагностические биомаркеры для использования в повседневной практике для повышения точности и воспроизводимости диагноза при некоторых сложных подтипах лимфомы.Например, новые иммуноокрашивания для CD30, ALK, CXCR-13 и PD-1 должны повысить точность диагностики лимфомы Ходжкина, ALK-положительной ALCL и ангиоиммунобластной Т-клеточной лимфомы. В таблице 2 показаны общие иммунофенотипические биомаркеры, используемые для диагностики этих подтипов лимфомы.

CD30 может помочь в стратификации риска и дифференциальной диагностике диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы и первичной крупноклеточной В-клеточной лимфомы средостения. Среди Т-клеточных лимфом для диагностики нескольких подтипов может быть полезно дополнительное тестирование CD30, например, NK / T-клеточная лимфома и ALCL.Экспрессия CD30 важна для диагностики кожных Т-клеточных лимфом, включая первичный кожный ALCL, лимфоматоидный папулез и грибовидный микоз (особенно при трансформации). CD30 может также помочь в распознавании посттрансплантационного лимфопролиферативного заболевания и лимфобластного лейкоза / лимфомы (как B-клеточного, так и T-клеточного типов) в редких случаях.

Недавно экспрессия CD30 была идентифицирована у подгруппы пациентов с острым лимфобластным лейкозом, острым миелоидным лейкозом (рис. 3) и миелодиспластическим синдромом. ^3,4 Заболевания тучных клеток и болезнь Кастлемана могут представлять случайные случаи, когда экспрессия CD30 может быть полезной для распознавания фенотипа заболевания, хотя такое использование было показано у нескольких пациентов. Помимо гематологических злокачественных новообразований, несколько солидных опухолей, в том числе семинома, эмбриональная карцинома, карцинома эндометрия, опухоли зародышевых клеток и меланома, также могут демонстрировать переменную экспрессию CD30. Биология и роль CD30 в развитии и прогрессировании этих злокачественных новообразований неизвестны.

Рекомендации по тестированию экспрессии CD30

Рекомендации по окрашиванию CD30 основаны на рекомендациях Национальной комплексной онкологической сети, обычно используемых для лимфомы Ходжкина и ALCL, при наличии соответствующих контролируемых рабочих процедур. ¹⁰
Мембранная и точечная картина окраски цитоплазмы на CD30 типична для этих заболеваний, в то время как сильное цитоплазматическое окрашивание наблюдается в новообразованиях плазматических клеток и окрашивание мембран при эмбриональной карциноме.Как правило, фоновое окрашивание практически отсутствует.

Антитела к CD30, которые были предложены для диагностического использования (Ber-h3, 1G12, JCM182, 15B3 и CON6D / B5), обычно обеспечивают хорошее качество и точность окрашивания. Метод извлечения антигена, используемый с этими антителами, представляет собой извлечение антигена, индуцированное нагреванием. Ткань миндалин рекомендуется в качестве положительного контроля, хотя активированные
Т-лимфоциты и В-клетки из межфолликулярной и перифолликулярной областей также могут хорошо работать в качестве внутреннего контроля.Количественное определение экспрессии CD30 рассчитывают либо как процент, либо как интенсивность окрашивания среди интересующих клеток. Способы обработки и окрашивания тканей сильно влияют на интерпретацию иммуногистохимических результатов.

Группа нордического иммуногистохимического контроля качества (NordiQC) способствует повышению качества иммуногистохимии и предоставляет информацию о ее клиническом применении. ¹¹ С 2004 года количество лабораторий, участвовавших в тестировании экспрессии CD30 с помощью NordiQC, увеличилось более чем вдвое — с 74 до 172.Однако доля этих лабораторий, которые могут обеспечить оптимальное окрашивание, снизилась с 92% до 77% за то же время. ¹¹ Основные причины неадекватного окрашивания в этих лабораториях включают использование антител в неправильной концентрации (слишком высокой или слишком низкой), недостаточное время для извлечения антигена, неадекватную промывку для удаления несвязанного антитела и плохое обращение с образцом во время фиксации. и этапы секционирования.

Национальный институт здравоохранения и повышения квалификации (NICE) также разработал руководящие принципы для нескольких программ клинической и диагностической оценки. ¹² Окрашивание на CD30 включено в качестве пилотной программы. Эта программа полагается на внешних экспертов в области здравоохранения для разработки протоколов. До сих пор он еще не выпустил стандартные протоколы, специфичные для CD30.

В нашем недавнем исследовании пациентов с диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомой 20% экспрессия использовалась в качестве порога для определения CD30-положительного статуса. ¹³ Следовательно, любые пациенты с диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомой с менее чем 20% экспрессией в опухолевых клетках считались отрицательными.Некоторые исследования использовали 30% экспрессию в качестве порогового значения, но вполне вероятно, что этот уровень дает результаты, очень похожие на результаты, полученные при пороговом значении 20%.

Включение окрашивания CD30 в лабораторные исследования может повысить воспроизводимость диагноза, особенно в случаях лимфомы. Как для лимфомы Ходжкина, так и для ALCL окрашивание на CD30 следует проводить у всех пациентов. Во многих случаях окрашивание экспрессии CD30 может помочь классифицировать конкретный подтип рака для лучшей стратификации риска и поддержки клинических испытаний.

Влияние тестирования экспрессии CD30 на понимание лимфомы

В 2013 году были опубликованы два исследования, которые продемонстрировали потенциальную важность тестирования экспрессии CD30 для определения оптимальной стратегии лечения. В первом исследовании оценивалась экспрессия CD30 среди множества периферических Т-клеточных лимфом, отличных от ALCL. ¹⁴ В целом, 43,2% случаев оказались CD30-положительными с оценкой 2+ или более.

Во втором из этих исследований профили экспрессии генов и иммуногистохимия были выполнены на образцах периферической Т-клеточной лимфомы. ¹⁵ Когда CD30-положительная периферическая Т-клеточная лимфома сравнивалась с CD30-отрицательными случаями, были выявлены уникальные молекулярные и фенотипические признаки, включающие пути Т-клеточного рецептора, которые были значительно подавлены в CD30-положительных случаях. У пациентов с экспрессией CD30 тирозинкиназы, участвующие в передаче сигналов проксимального Т-клеточного рецептора, дифференцировке и активации Т-клеток (Lck, Fyn и Itk), либо отсутствовали, либо обнаруживались на уровнях, которые были значительно ниже по сравнению с CD30-отрицательными. пациенты.Антигены клеточной поверхности, ответственные за дифференцировку и активацию Т-клеток, такие как CD69, ICOS и CD52, также были заметно снижены в экспрессии в CD30-положительной периферической Т-клеточной лимфоме. Напротив, несколько факторов транскрипции, включая JunB, MUM1 / IRF4, STAT3, C / EBPβ и циклин D3, были значительно активированы. Дифференциальные сигнатуры экспрессии генов могут частично объяснить лучший прогноз CD30-положительной периферической Т-клеточной лимфомы по сравнению с CD30-отрицательной периферической Т-клеточной лимфомой.

Известно, что диффузная В-клеточная лимфома большого размера имеет несколько типов вариантов, подгрупп, подтипов и других сущностей. Наиболее распространенные морфологические варианты включают центробластный, иммунобластический и анапластический. Каждый из различных вариантов диффузной В-крупноклеточной лимфомы связан с определенным исходом. Возможно, что CD30 может влиять на прогноз и патогенез этих пациентов. Существует 3 основных молекулярных подтипа диффузной В-крупноклеточной лимфомы. В случае B-клеточного варианта зародышевого центра экспрессия CD30 коррелирует с экспрессией CD10 и других биомаркеров зародышевого центра.Напротив, в случаях активированного B-клеточного варианта экспрессия CD30 вместо этого коррелирует с экспрессией MUM-1 и FOXP-1. ¹³ CD30 экспрессируется с очень высокой частотой у пациентов с вирусом Эпштейна-Барра. ^16,17 Внутрисинусоидальное распределение клеток, экспрессирующих CD30, может имитировать представление ALCL.

Было обнаружено, что при диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфоме экспрессия CD30 коррелирует с ответом на лечение и выживаемостью пациентов. ¹³ По сравнению с CD30-отрицательным заболеванием, CD30-положительное заболевание было связано со значительно более высокой общей выживаемостью ( P =.0327) и улучшенная выживаемость без прогрессирования, которая почти достигла значимости ( P = 0,0544). Профилирование экспрессии генов обнаружило 99 генов, которые были дифференцированно активированы, и 55 генов, которые были подавлены, при CD30-положительном заболевании. Повышающая регуляция в основном включала гены, участвующие в регуляции NF-κB, пролиферации лимфоцитов и рецепторов смерти. Подавление в первую очередь затрагивает пути В-клеточных рецепторов, которые, как известно, играют важную роль в патогенезе этого типа опухоли, а также пути цитокинов и хемокинов.

Когда пациентов с диффузной большой В-клеточной лимфомой с CD30-положительным заболеванием сравнивают с теми, кто является CD30-отрицательным, 3 биологических параметра, по-видимому, показывают значительную корреляцию со статусом CD30. У CD30-положительных пациентов коэкспрессия Myc / Bcl-2 значительно ниже (23% против 36%; P = 0,0483), хромосомные аберрации в Myc значительно ниже (0% против 13%; P ). = 0,0100), а экспрессия p21 значительно выше (24% против 11%; P = 0,0034). ¹³ Без этих факторов CD30 не является независимым прогностическим фактором для лучшей выживаемости у пациентов с диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомой.

Инфекция вирусом Эпштейна-Барра была оценена независимо у пациентов с диффузной В-клеточной лимфомой. Пациенты с вирусом Эпштейна-Барра и CD30-положительным заболеванием имели значительно более низкую общую выживаемость по сравнению с пациентами с CD30-отрицательным заболеванием (независимо от того, были ли CD30-отрицательные пациенты положительными или отрицательными по вирусу Эпштейна-Барра). ¹⁶ Анализ экспрессии генов показывает, что активация NF-κB и пути JAK-STAT имеют решающее значение.

CD30, оцененная с помощью иммуногистохимии и проточной цитометрии, недавно была использована для дальнейшего уточнения диагноза, дифференциальной диагностики и биологической характеристики подтипов лимфомы. Количественный анализ экспрессии и интенсивности CD30 дает ценную информацию для стратификации риска у пациентов с лимфомой, что дает обоснование для эффективной таргетной терапии.Поскольку CD30 был экспрессирован в подгруппе пациентов с Т-клетками, В-клетками, NK-клетками и лимфомой Ходжкина высокой степени злокачественности, рекомендуется использовать иммуногистохимию и / или проточную цитометрию у всех пациентов с лимфомой высокой степени злокачественности во время диагностики. проработка. Этот подход может также применяться к солидным опухолям, которые экспрессируют CD30 в различной степени, таким как семинома, меланома, карцинома эндометрия и опухоли зародышевых клеток. Точное и надежное обнаружение и измерение CD30 как для неопластических, так и для неопухолевых заболеваний, вероятно, предоставит информацию, которая важна для принятия решений о лечении и выбора режима, учитывая последние достижения в разработке методов лечения, нацеленных на антиген CD30.Стандартизация методов обнаружения; соответствующее обращение с тканями и их обработка; контроль и гарантия качества; хорошо контролируемые системы окрашивания, реагенты или коммерческие наборы; воспроизводимые методы; а разработка эталонных методов с согласованными руководящими принципами должна быть интегрирована в повседневную патологическую практику в общественных местах и ​​академических больницах для поддержки персонализированной терапии в эпоху молекулярной медицины.

Сводка

Оптимальный контроль качества и стандартизация протокола для окрашивания CD30 будут иметь решающее значение для повышения точности тестирования и воспроизводимости тестирования (Таблица 3).Правильная обработка образцов и извлечение антигена имеют решающее значение, а используемый метод обнаружения требует стандартизации (таблица 4). Текущая классификация лимфом объединяет ряд иммунофенотипических и геномных биомаркеров. Добавление CD30 и других биомаркеров, таких как Bcl-2, Myc и p53, может предложить лучшее понимание патогенеза лимфомы и прогрессирования заболевания, а также предоставить важную поддержку для стратификации риска и рекомендаций по схемам лечения. Включение коррелятивных исследований с экспрессией CD30 в клинические испытания не только приведет к лучшему пониманию патофизиологии CD30-положительных заболеваний и нисходящего сигнального пути, но также представит важные терапевтические концепции и цели для онкологических больных в ближайшем будущем.

Благодарность

Д-р Янг получил поддержку от онкологического центра им. М. Д. Андерсона Техасского университета в рамках гранта на институциональные исследования, присуждения награды за программу научных исследований в рамках специализированных программ передового опыта в области лимфомы (SPORE) доктора медицины Андерсона и награды за программу научных исследований SPORE от доктора медицины Андерсона. Он также частично поддерживается грантами Национального института рака и Национальных институтов здравоохранения (R01CA138688, 1RC1CA146299, P50CA136411 и P50CA142509).

Список литературы

1. Орази А., Фукар К., Ноулз Д., Вайс Л. М., ред. Неопластическая гематопатология Ноулза . 3-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: Липпинкотт Уильямс и Уилкинс; 2013.

2. Хен С.Т., Гроган Т.М., Миллер Т.П. Использование тонкоигольной аспирации в качестве метода диагностики лимфомы. Дж. Клин Онкол . 2004; 22 (15): 3046-3052.

3. Чжэн В., Медейрос Л.Дж., Янг К.Х. и др. Экспрессия CD30 при остром лимфобластном лейкозе по данным анализа проточной цитометрии. Лимфома лейк . 2014; 55 (3): 624-627.

4. Чжэн В., Медейрос Л.Дж., Ху Й. и др. Экспрессия CD30 при остром миелоидном лейкозе высокого риска и миелодиспластических синдромах. Clin лимфома миелома лейк . 2013; 13 (3): 307-314.

5. Васик М.А., Хименес Г.С., Вайзенбургер Д.Д. Нацеливание на CD30 в злокачественных тканях: проблемы обнаружения и клинического применения. Патобиология . 2013; 80 (5): 252-258.

6. Swerdlow H, Campo E, Harris HL, et al, eds. Классификация опухолей кроветворной и лимфоидной тканей ВОЗ .4-е изд. Лион, Франция: Международное агентство по изучению рака; 2008.

7. Пилери С.А., Аскани С., Леончини Л. и др. Лимфома Ходжкина: взгляд патологоанатома. Дж. Клин Патол . 2002; 55 (3): 162-176.

8. Восе Дж., Армитаж Дж., Вайзенбургер Д.; Международный проект по Т-клеточной лимфоме. Международное исследование периферических Т-лимфоцитов и естественных киллеров / Т-клеточной лимфомы: результаты патологии и клинические результаты. Дж. Клин Онкол . 2008; 26 (25): 4124-4130.

9. Matasar MJ, Shi W., Silberstien J, et al. Экспертный обзор патологии лимфомы второго мнения в эпоху классификации Всемирной организации здравоохранения. Энн Онкол . 2012; 23 (1): 159-166.

10. Неходжкинские лимфомы. Руководство по клинической практике онкологии. Версия 1.2014. Национальная всеобъемлющая онкологическая сеть. http://www.nccn.org/professionals/physician_gls/f_guidelines.asp#site. По состоянию на 23 февраля 2014 г.

11. CD30. NordiQC. Скандинавский иммуногистохимический контроль качества.http://www.nordiqc.org/Epitopes/CD30/CD30.htm. Обновлено 3 марта 2011 г. Проверено 23 февраля 2014 г.

12. Предлагаемые оценки технологий. NICE: Национальный институт здоровья и заботы об отличных условиях. http://www.nice.org.uk/ourguidance/niceguidancebytype/technologyappraisals/proposedappraisals/nowave.jsp#HLBrentuximabVedotin. По состоянию на 23 февраля 2014 г.

13. Hu S, Xu-Monette ZY, Balasubramanyam A, et al. Экспрессия CD30 определяет новую подгруппу диффузной крупноклеточной B-клеточной лимфомы с благоприятным прогнозом и отличительной сигнатурой экспрессии генов: отчет международного исследования программы DLBCL Rituximab-CHOP Consortium Program Study. Кровь . 2013; 121 (14): 2715-2724.

14. Sabattini E, Pizzi M, Tabanelli V, et al. Экспрессия CD30 в периферических Т-клеточных лимфомах. Haematologica . 2013; 98 (8): e81-e82.

15. Bisig B, de Reyniès A, Bonnet C и др. CD30-положительные периферические Т-клеточные лимфомы имеют общие молекулярные и фенотипические особенности. Haematologica . 2013; 98 (8): 1250-1258.

16. Хорошо CY, Папатомас Т.Г., Медейрос Л.Дж., Янг К.Х. ВЭБ-положительная диффузная В-крупноклеточная лимфома пожилых людей. Кровь . 2013; 122 (3): 328-340.

17. Ok CY, Li L, Xu-Monette Z, et al. Распространенность и клинические последствия инфекции вирусом Эпштейна-Барра при диффузной большой В-клеточной лимфоме de novo в западных странах [опубликовано в Интернете 28 февраля 2014 г.]. Clin Cancer Res . DOI: 10.1158 / 1078-0432.CCR-13-3157.

Эволюция CD30 как мишени при лимфоме Ходжкина, зрелой Т-клеточной лимфоме и других лимфомах

Анас Юнес, MD

Заведующий лимфомной службой

Мемориальный онкологический центр им. Слоуна Кеттеринга

Нью-Йорк, Нью-Йорк

Ориентация на CD30

CD30 стал важной молекулой в области таргетной терапии, поскольку его экспрессия обычно ограничивается определенными болезненными состояниями, что делает его идеальной мишенью для ингибирования.Ранние попытки нацелить CD30 с использованием голых антител имели переменный успех. ¹ Полностью гуманизированное моноклональное антитело против CD30 иратумумаб (MDX-060) показало лишь умеренную активность в фазе 1 испытания пациентов с рецидивирующей или рефрактерной CD30-экспрессирующей лимфомой Ходжкина или ALCL. ² Аналогичным образом, в фазах 1 и 2 испытаний химерное моноклональное антитело против CD30 SGN-30 давало мало ответов у пациентов с ALCL и не давало ответов у пациентов с лимфомой Ходжкина. ^3,4

Разработка нового конъюгата антитело-лекарственное средство брентуксимаб ведотин (SGN-35) явилась крупным достижением в попытке клинического воздействия на CD30.Этот агент состоит из ранее исследованного «голого» анти-CD30-антитела SGN-30, конъюгированного с синтетическим антитубулиновым агентом монометилауристатином E (MMAE; фиг. 4). 2 части брентуксимаб ведотина конъюгированы через дипептидный линкер, который расщепляется лизосомальными ферментами при опосредованной рецептором интернализации в клетки-мишени. ^5-7 После высвобождения MMAE вызывает остановку роста клеток с последующим апоптозом. ^5,8 Кроме того, накопление MMAE во внеклеточном пространстве может усилить его мощную противораковую активность, в результате чего он может оказывать цитотоксическое действие на соседние опухолевые клетки, поскольку сам по себе проницаем для мембран. ⁹ Другой потенциальный механизм действия, приписываемый брентуксимаб ведотину, связан с CD30-направленным антителом, которое может прерывать связывание лиганда CD30 с его рецептором. ⁵

Доклинические эксперименты показали, что добавление цитотоксической молекулы MMAE к антителу против CD30 привело к значительному усилению остановки роста CD30-экспрессирующих клеточных линий и большей противоопухолевой активности в моделях ксенотрансплантата мышей как болезни Ходжкина, так и ALCL. ⁸ Эта активность была высокоспецифичной, при этом конъюгат антитело-лекарственное средство ассоциировался с 300-кратной большей активностью в CD30-экспрессирующих клетках по сравнению с CD30-негативными клетками.Ранние клинические исследования брентуксимаб ведотина подтвердили его многообещающую доклиническую активность, что привело к значительным и клинически значимым ответам как при болезни Ходжкина, так и при ALCL.

Клиническая разработка брентуксимаба ведотина при лимфоме Ходжкина и ALCL

В пилотном открытом многоцентровом исследовании фазы 1 с увеличением дозы монотерапия брентуксимаб ведотин исследовалась у 45 пациентов с рецидивирующими или рефрактерными лимфомами, экспрессирующими CD30 (42 пациента с лимфомой Ходжкина, 2 пациента с системным ALCL, и 1 пациент с ангиоиммунобластной Т-клеточной лимфомой). ¹⁰ Эти пациенты прошли интенсивное предварительное лечение (в среднем из трех предыдущих схем химиотерапии), и большинство из них (73%) перенесли ранее трансплантацию стволовых клеток. Брентуксимаб ведотин вводили по графику один раз в 3 недели в дозах от 0,1 до 3,6 мг / кг. Максимальная переносимая доза была определена как 1,8 мг / кг, и связанные с ней токсические эффекты были в основном 1 или 2 степени и включали утомляемость (36%), гипертермию (33%), диарею (22%), тошноту (22%), нейтропению ( 22%) и периферической невропатии (22%).Частота объективного ответа в общей популяции лечения составила 38% (при 24% полных ремиссиях), но увеличилась до 50% среди пациентов, получивших максимально переносимую дозу. Компьютерная томография подтвердила регресс опухоли у 86% пациентов. Ответы оказались устойчивыми, в среднем 9,7 месяцев.

Было также проведено последующее исследование фазы 1 с увеличением дозы, в котором монотерапия брентуксимаб ведотин вводилась 44 пациентам с рецидивирующими или рефрактерными лимфомами, экспрессирующими CD30 (38 пациентов с лимфомой Ходжкина, 5 пациентов с системной ALCL и 1 пациент с периферическая Т-клеточная лимфома, если не указано иное). ¹¹ Опять же, пациенты подвергались тщательному предварительному лечению (в среднем из 3 предшествующих схем химиотерапии), и 68% ранее перенесли трансплантацию стволовых клеток. В отличие от предыдущего исследования фазы 1, в котором препарат вводили один раз каждые 3 недели, в этом исследовании брентуксимаб ведотин вводили один раз в неделю в течение 3 недель из 4-недельного цикла. Дозы варьировались от 0,4 до 1,4 мг / кг, и было установлено, что максимальная переносимая доза при этом режиме составляет 1,2 мг / кг. Хотя токсичность, о которой сообщалось в исследовании, была аналогична токсичности в пилотном исследовании, их частота была выше; периферическая невропатия возникла у 66%, утомляемость у 52%, тошнота у 50%, диарея у 32%, артралгия у 27% и гипертермия у 25%.Возникновение периферической нейропатии оказалось более значительным в этом исследовании: 14% пациентов сообщили о периферической невропатии 3 степени, а 8 пациентов прекратили лечение из-за этого побочного эффекта. Частота объективного ответа также была немного выше как среди всей популяции, получавшей лечение (59%, с 34% полных ремиссий), так и среди пациентов, получавших максимально переносимую дозу (58%).

Недельный график дозирования, по-видимому, существенно не увеличивал общую активность брентуксимаб ведотина, но был связан с высокой частотой периферической нейропатии.Поэтому для продолжения разработки в 2 фазе 2 испытаний был выбран график один раз в 3 недели. ^12,13 Оба исследования были одноэтапными, многоцентровыми исследованиями, в которых проводилось до 16 циклов монотерапии брентуксимаб ведотин в дозе 1,8 мг / кг один раз в 3 недели. В исследование были включены пациенты с рецидивирующей или рефрактерной лимфомой, экспрессирующей CD30 (лимфома Ходжкина или системный ALCL), и первичной конечной точкой была общая частота объективного ответа, определенная независимым центральным центром обзора.

В первом исследовании фазы 2, в котором участвовали 102 пациента с лимфомой Ходжкина, у подавляющего большинства (94%) наблюдалось уменьшение опухоли, а уровень контроля заболевания (полная ремиссия, частичная ремиссия или стабильное заболевание) составлял 96%. ¹² Средняя выживаемость без прогрессирования составила 7,8 месяцев (рис. 5). Сообщалось о 75% объективных ответах, из которых 34% были полными ремиссиями. В целом, средняя продолжительность ответа составила 6,7 месяца, но она была значительно увеличена (до 20.5 месяцев) среди пациентов с полной ремиссией. Более половины (55%) пациентов испытали значительную токсичность (нежелательное явление степени 3 или выше), включая нефебрильную нейтропению (20%), периферическую сенсорную невропатию (8%), тромбоцитопению (8%) и анемию (6%). ). Побочные эффекты привели к задержке приема препарата у 47% пациентов. Наиболее частые нежелательные явления всех степеней, связанные с лечением, включали периферическую сенсорную невропатию (42%), тошноту (35%), усталость (34%), нейтропению (19%), диарею (18%), гипертермию (14%). , рвота (13%), артралгия (12%), зуд (12%), миалгия (11%), периферическая моторная нейропатия (11%) и алопеция (10%).

Во вторую фазу 2 исследования было включено 58 пациентов с системным ALCL (28% и 72% с ALK-положительным и ALK-отрицательным заболеванием, соответственно). ¹³ Опять же, у большого числа пациентов удалось добиться уменьшения опухоли (97%), а уровень объективного ответа составил 86% (включая 57% полных ремиссий). ALK-статус заболевания, по-видимому, не оказал существенного влияния на ответ на лечение, поскольку аналогичная доля ALK-положительных и ALK-отрицательных пациентов достигла объективного ответа (81% и 88% соответственно), а средняя продолжительность ответа не различалась. значительно между 2 группами.Нежелательные явления степени 3 и выше были зарегистрированы у 60% пациентов, включая нефебрильную нейтропению (21%), тромбоцитопению (14%), периферическую сенсорную невропатию (12%) и анемию (7%). Примерно четверть (24%) пациентов прекратили лечение из-за побочных эффектов, а 40% потребовали отсрочки приема препарата. Наиболее частые нежелательные явления всех степеней, связанные с лечением, включали периферическую сенсорную невропатию (41%), тошноту (40%), усталость (38%), гипертермию (34%), диарею (29%), сыпь (24%). , запор (22%) и нейтропения (21%).

На основании положительной активности и хорошо переносимого профиля токсичности в этих многоцентровых исследованиях фазы 2, Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США предоставило ускоренное разрешение на применение брентуксимаб ведотина по 2 показаниям. ¹⁴ Первый предназначен для лечения пациентов с лимфомой Ходжкина после неудачной трансплантации аутологичных стволовых клеток (ASCT) или после неудачи по крайней мере двух предыдущих схем мультиагентной химиотерапии у пациентов, которые не являются кандидатами на трансплантацию. Второе показание — лечение пациентов с системным ALCL после неудачи по крайней мере 1 предшествующего режима мультиагентной химиотерапии.Первоначальное разрешение позволяло продолжить лечение до 16 циклов; в 2013 году продолжительность была увеличена, чтобы позволить лечение до прогрессирования заболевания или возникновения неприемлемой токсичности.

Клинические испытания брентуксимаба ведотина, которые могут повлиять на стандарты лечения лимфомы Ходжкина

В нескольких клинических испытаниях изучается только брентуксимаб ведотин или как часть режима комбинированной химиотерапии. Добавление брентуксимаб ведотина к химиотерапии может улучшить частоту ответа либо на лечение отдельно, либо увеличить скорость полной ремиссии или продолжительность ответа.Брентуксимаб ведотин также может быть более переносимой альтернативой более токсичному режиму.

До Allo-SCT

Chen и его коллеги провели ретроспективный анализ пациентов с рецидивирующей или рефрактерной лимфомой Ходжкина, которые лечились брентуксимаб ведотином в клинических испытаниях, а затем подверглись аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток пониженной интенсивности (алло-SCT). ¹⁵ Среди 18 пациентов 17 ранее перенесли ASCT.Это небольшое исследование пациентов с рецидивирующей / рефрактерной лимфомой Ходжкина, подвергавшихся тщательному предварительному лечению, показало, что брентуксимаб ведотин может быть эффективным и менее токсичным лечением, допускающим эту процедуру с меньшей интенсивностью.

Рецидив / рефрактерный

Текущее клиническое испытание фазы 1 оценивает комбинацию брентуксимаб ведотина с темсиролимусом у пациентов с рецидивирующей или рефрактерной лимфомой Ходжкина после неэффективности ASCT или по крайней мере 2 предшествующих схем цитотоксической химиотерапии. ¹⁶ Это исследование с увеличением дозы позволит проводить лечение до 16 циклов.

В настоящее время проводится фаза 1/2 многоцентрового исследования для оценки безопасности и эффективности брентуксимаб ведотина в сочетании с бендамустином у пациентов с лимфомой Ходжкина или ALCL, которые либо рецидивировали, либо не ответили на начальное лечение. ¹⁷ Пациенты с лимфомой Ходжкина имеют право на участие в исследовании, если они потерпели неудачу или отказались от ASCT; Пациенты, не являющиеся кандидатами на ASCT, должны не пройти как минимум 2 предыдущих режима мультиагентной химиотерапии.Пациенты с ALCL имеют право на участие в исследовании, если они не прошли по крайней мере 1 предыдущую схему мультиагентной химиотерапии, и если они не соответствуют критериям ASCT или отказались от нее.

Одной из наиболее широко используемых схем химиотерапии в условиях терапии спасения является ифосфамид, карбоплатин и этопозид (ICE). Химиотерапия ICE связана с многочисленными побочными эффектами и обычно требует госпитализации пациента для лечения. Ответ на ICE часто отслеживают с помощью позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ), которую можно использовать для измерения аномальной метаболической активности при заболевании.Целью лечения является получение отрицательного результата ПЭТ-сканирования (отсутствие аномальной активности) до ASCT, поскольку этот результат предсказывает лучший результат после трансплантации. Одно клиническое испытание оценивает использование брентуксимаб ведотина вместо ICE в этих условиях как способ достижения полной ремиссии с меньшей токсичностью до трансплантации стволовых клеток. ¹⁸ Пациенты без аномальной активности при ПЭТ-сканировании будут проходить трансплантацию стволовых клеток без ICE. Пациентам с признаками аномальной активности при ПЭТ-сканировании будут предложены дополнительные варианты лечения, такие как химиотерапия ICE.Хотя это исследование продолжается, ранние опубликованные результаты свидетельствуют о том, что несколько пациентов смогли достичь полной ремиссии только с помощью терапии спасения брентуксимаб ведотином. ¹⁹

Консолидация ASCT

AETHERA (Расширенное испытание ADC для Ходжкина для оценки прогрессирования после аутологичной ТСК) — это продолжающееся рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое клиническое исследование фазы 3, оценивающее эффективность брентуксимаб ведотина у пациентов с высоким риском резидуальной лимфомы Ходжкина после ASCT. ²⁰ В этом исследовании пациенты, перенесшие трансплантацию, были рандомизированы для лечения либо брентуксимаб ведотином, либо плацебо, причем оба препарата получали наилучшую поддерживающую терапию. Первичной конечной точкой исследования является выживаемость без прогрессирования заболевания, а общая выживаемость входит в число вторичных конечных точек.

Линия фронта

ECHELON-1 (Фаза 3 исследования первичной терапии у пациентов с прогрессирующей классической лимфомой Ходжкина) — это продолжающееся открытое многоцентровое исследование фазы 3.Пациенты с лимфомой Ходжкина рандомизируются для лечения на переднем крае либо стандартной химиотерапии (доксорубицин, блеомицин, винбластин и дакарбазин), либо по аналогичной схеме химиотерапии (доксорубицин, винбластин и дакарбазин) плюс брентуксимаб ведотин. ²¹ Основная цель этого исследования — модифицированная выживаемость без прогрессирования заболевания; общая выживаемость — вторичная конечная точка. Дизайн этого исследования включал результаты исследования фазы 1, в котором была обнаружена чрезмерная токсичность по формуле с комбинацией блеомицина и брентуксимаб ведотин ²² ; это открытие привело к исключению блеомицина из комбинированной схемы для исследования фазы 3.

Оценка брентуксимаба ведотина при других CD30-экспрессирующих лимфоидных злокачественных новообразованиях

Подмножества других лимфоидных злокачественных новообразований также экспрессируют CD30, включая первичные большие B-клеточные лимфомы средостения (подмножество диффузных больших B-клеточных лимфом), периферические T-клеточные лимфомы, не указанные иначе, и некоторые кожные злокачественные новообразования, такие как кожный ALCL, грибовидный микоз и лимфоматоидный папулез. Экспрессия CD30 при этих других злокачественных новообразованиях ниже, чем при лимфоме Ходжкина и ALCL, что, по-видимому, коррелирует с более низкой частотой ответа на брентуксимаб ведотин при этих формах рака.В конечном итоге CD30 можно рассматривать как биомаркер для лечения этих злокачественных новообразований, благодаря чему экспрессия этого антигена может использоваться для выбора лечения, такого как брентуксимаб ведотин.

Установление передовой линии зрелых CD30-экспрессирующих Т-клеточных злокачественных новообразований

ECHELON-2 (Сравнение брентуксимаба ведотина и CHP со стандартным лечением CHOP при лечении пациентов с CD30-положительными зрелыми Т-клеточными лимфомами) — это двойное слепое рандомизированное многоцентровое исследование, предназначенное для сравнения эффективности и безопасность брентуксимаб ведотина в сочетании с циклофосфамидом, доксорубицином и преднизоном по сравнению с циклофосфамидом, доксорубицином, винкристином и преднизоном (CHOP) по отдельности, оба назначены на переднем крае. ²³ Режим циклофосфамида, доксорубицина и преднизона используется с брентуксимаб ведотином из-за возможности перекрытия нейротоксичности между этим агентом и винкристином. В это исследование будут включены CD30-положительные пациенты со зрелыми Т-клеточными лимфомами, такими как ALCL, неходжкинская лимфома и другие Т-клеточные лимфомы. Пациенты считаются CD30-положительными, если не менее 10% опухолевых клеток экспрессируют CD30. Выживаемость без прогрессирования заболевания является первичной конечной точкой исследования, а частота объективного ответа и общая выживаемость — среди вторичных конечных точек.

Рецидивирующие или рефрактерные лимфоидные злокачественные новообразования, экспрессирующие CD30

В настоящее время проводится открытое многоцентровое клиническое исследование фазы 2 для изучения безопасности и эффективности брентуксимаб ведотина у пациентов с другими рецидивирующими или резистентными лимфоидными злокачественными новообразованиями, экспрессирующими CD30. ²⁴ Это исследование состоит из 2 частей: первая предназначена для оценки монотерапии брентуксимаб ведотин при CD30-экспрессирующей неходжкинской лимфоме, а вторая оценивает брентуксимаб ведотин в комбинации с ритуксимабом для лечения диффузной В-клеточной лимфомы большого размера. .Комбинация брентуксимаб ведотина с ритуксимабом и CHOP также тестируется в качестве передовой терапии в рандомизированном исследовании фазы 2 у пациентов с диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомой. ²⁵ Брентуксимаб ведотин также проходит оценку для лечения CD30-экспрессирующих кожных Т-клеточных лимфом в рамках открытого исследования фазы 2. ²⁶

Также было показано, что нелимфоматозные злокачественные новообразования экспрессируют CD30. В рамках продолжающегося открытого многоцентрового исследования фазы 2 брентуксимаб ведотин оценивается как единственный агент у пациентов с различными нелимфоматозными злокачественными новообразованиями, экспрессирующими CD30. ²⁷ В этом исследовании пациенты будут получать 1 из 3 различных уровней доз брентуксимаб ведотина — 1,8 мг / кг один раз в 3 недели; 2,4 мг / кг один раз в 3 недели или 1,2 мг / кг еженедельно в течение 3 недель 4-недельного цикла. Недавно было опубликовано раннее обследование 3 пациентов с рецидивирующим или рефрактерным CD30-экспрессирующим раком яичка, которые лечились в этом исследовании, что позволяет предположить, что брентуксимаб ведотин был безопасен и активен у этих пациентов. ²⁸ Распространенные и устойчивые к платине CD30-экспрессирующие опухоли зародышевой линии являются специфической мишенью в открытом исследовании фазы 2, в котором пациенты будут получать агент в качестве терапии спасения. ²⁹

Рецидив кожной Т-клеточной лимфомы

Исследование ALCANZA (исследование фазы 3 брентуксимаба ведотина по сравнению с выбором врачом метотрексата или бексаротена у пациентов [пациенты] с CD30-положительной [CD30 +] кожной Т-клеточной лимфомой) — это клиническое исследование фазы 3 брентуксимаб ведотина у пациентов с кожным рецидивом. Т-клеточная лимфома, в которой не менее 10% неопластических клеток экспрессируют CD30. ³⁰ Первичной конечной точкой является общий уровень ответа, продолжающийся не менее 4 месяцев.Ожидается, что будет набрано около 124 пациентов.

Благодарность

Доктор Юнес получил гонорары и поддержку в проведении клинических исследований от компаний Seattle Genetics и Millennium Pharmaceuticals.

Список литературы

1. Юнес А. Терапия антителами, нацеленными на CD30. Curr Opin Oncol . 2011; 23 (6): 587-593.

2. Анселл С.М., Хорвиц С.М., Энгерт А. и др. Исследование фазы I / II моноклонального антитела против CD30 (MDX-060) при лимфоме Ходжкина и анапластической крупноклеточной лимфоме. Дж. Клин Онкол . 2007; 25 (19): 2764-2769.

3. Бартлетт Н.Л., Юнес А., Карабаси М.Х. и др. Многодозовое исследование фазы 1 иммунотерапии SGN-30 у пациентов с рефрактерными или рецидивирующими гематологическими злокачественными новообразованиями CD30 +. Кровь. , 2008; 111 (4): 1848-1854.

4. Фореро-Торрес А., Леонард Дж. П., Юнес А. и др. Исследование фазы II SGN-30 (mAb против CD30) при лимфоме Ходжкина или системной анапластической крупноклеточной лимфоме. Br J Haematol . 2009; 146 (2): 171-179.

5.Чен Х, Сома Л.А., Фромм-младший. Таргетная терапия лимфомы Ходжкина и системной анапластической крупноклеточной лимфомы: основное внимание уделяется брентуксимабу ведотину. Onco Targets Ther. 2013; 7: 45-56.

6. Сандерсон Р.Дж., Геринг М.А., Джеймс С.Ф. и др. Стабильность лекарственного средства-линкера in vivo иммуноконъюгата ауристатина, связанного с дипептидом CD30. Clin Cancer Res . 2005; 11 (2 Pt 1): 843-852.

7. Офлазоглу Э., Кисслер К.М., Сиверс Э.Л., Гревал И.С., Гербер Х.П. Комбинация конъюгата анти-CD30-ауристатин-Е-антитело-лекарственное средство (SGN-35) с химиотерапией улучшает противоопухолевую активность при лимфоме Ходжкина. Br J Haematol. 2008; 142 (1): 69-73.

8. Франсиско Дж. А., Червени К. Г., Мейер Д. Л. и др. cAC10-vcMMAE, конъюгат анти-CD30-монометилауристатин Е с сильной и селективной противоопухолевой активностью. Кровь. 2003; 102 (4): 1458-1465.

9. Окли Н.М., Миямото Дж. Б., Чжан Х и др. Внутриклеточная активация SGN-35, мощного конъюгата анти-CD30-антитело-лекарственное средство. Clin Cancer Res . 2010; 16 (3): 888-897.

10. Юнес А., Бартлетт Н.Л., Леонард Дж. П. и др.Брентуксимаб ведотин (SGN-35) при рецидиве CD30-положительных лимфом. N Engl J Med. 2010; 363 (19): 1812-1821.

11. Фанале М.А., Фореро-Торрес А., Розенблатт Дж. Д. и др. Исследование еженедельной дозировки брентуксимаб ведотина I фазы у пациентов с рецидивирующими / рефрактерными CD30-положительными гематологическими злокачественными новообразованиями. Clin Cancer Res . 2012; 18 (1): 248-255.

12. Юнес А., Гопал А. К., Смит С. Е. и др. Результаты основного исследования фазы II брентуксимаб ведотина у пациентов с рецидивирующей или рефрактерной лимфомой Ходжкина. J Clin Oncol. 2012; 30 (18): 2183-2189.

13. Про Б., Адвани Р., Брис П. и др. Брентуксимаб ведотин (SGN-35) у пациентов с рецидивирующей или рефрактерной системной анапластической крупноклеточной лимфомой: результаты исследования фазы II. J Clin Oncol. 2012; 30 (18): 2190-2196.

14. де Кларо Р.А., Макгинн К., Квитковски В. и др. Резюме одобрения Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США: брентуксимаб ведотин для лечения рецидивирующей лимфомы Ходжкина или рецидивирующей системной анапластической крупноклеточной лимфомы. Clin Cancer Res. 2012; 18 (21): 5845-5849.

15. Чен Р., Палмер Дж. М., Томас Ш. и др. Брентуксимаб ведотин обеспечивает успешную аллогенную трансплантацию гемопоэтических клеток пониженной интенсивности у пациентов с рецидивирующей или рефрактерной лимфомой Ходжкина. Кровь . 2012; 119 (26): 6379-6381.

16. ClinicalTrials.gov. Темсиролимус и брентуксимаб ведотин в лечении пациентов с рецидивирующей или рефрактерной лимфомой Ходжкина. http://www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT010.Идентификатор: NCT010. По состоянию на 13 марта 2014 г.

17. ClinicalTrials.gov. Брентуксимаб ведотин и бендамустин для лечения лимфомы Ходжкина и анапластической крупноклеточной лимфомы (ALCL) (SGN + benda). http://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01657331. Идентификатор: NCT01657331. По состоянию на 27 февраля 2014 г.

18. ClinicalTrials.gov. Брентуксимаб ведотин (SGN-35) у подходящих для трансплантации пациентов с рецидивирующей или рефрактерной лимфомой Ходжкина. http://www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01508312.Идентификатор: NCT01508312. По состоянию на 13 марта 2014 г.

19. Moskowitz A, Schoder H, Gerecitano JF, et al. ФДГ-ПЭТ адаптированная последовательная терапия брентуксимаб ведотином и усиленным ICE с последующей трансплантацией аутологичных стволовых клеток для рецидивирующей и рефрактерной лимфомы Ходжкина. Кровь . 2013; 122 (21): 2099.

20. Маккарти Дж. М., Суреда А., Суитнем Дж., Московиц С. К., Кеннеди Д., Сиверс Э. Л. Активность, безопасность и переносимость конъюгата антитело-лекарственное средство (ADC) SGN-35 при рецидивирующей / рефрактерной (R / R) лимфоме Ходжкина (HL) и гематологических злокачественных новообразованиях CD30 + [ISHL abstract P107]. Haematologica . 2010; 95 (приложение 4). 21. ClinicalTrials.gov. Фаза 3 клинических испытаний терапии первой линии у пациентов с распространенной классической лимфомой Ходжкина. http://www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01712490. Идентификатор: NCT01712490. По состоянию на 13 марта 2014 г.

22. Юнес А., Коннорс Дж. М., Парк С. И. и др. Брентуксимаб ведотин в сочетании с ABVD или AVD для пациентов с впервые диагностированной лимфомой Ходжкина: открытое исследование фазы 1 с увеличением дозы. Ланцет Онкол. 2013; 14 (13): 1348-1356.

23. ClinicalTrials.gov. ECHELON-2: сравнение брентуксимаб ведотина и CHP со стандартным лечением CHOP при лечении пациентов с CD30-положительными зрелыми Т-клеточными лимфомами. http://www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01777152. Идентификатор: NCT01777152. По состоянию на 13 марта 2014 г.

24. ClinicalTrials.gov. Исследование брентуксимаб ведотина при рецидивирующей или рефрактерной неходжкинской лимфоме. http://www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01421667. Идентификатор: NCT01421667. По состоянию на 13 марта 2014 г.

25. ClinicalTrials.gov. Изучение комбинации брентуксимаб ведотина с RCHOP в качестве передовой терапии пациентов с диффузной крупноклеточной B-лимфомой (DLBCL). http://www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01925612. Идентификатор: NCT01925612. По состоянию на 13 марта 2014 г.

26. ClinicalTrials.gov. SGN-35 при CD30-положительных лимфопролиферативных заболеваниях (ALCL), грибовидном микозе (MF) и обширном лимфоматоидном папулезе (LyP). http://www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01352520. Идентификатор: NCT01352520.По состоянию на 13 марта 2014 г.

27. ClinicalTrials.gov. Брентуксимаб ведотин у пациентов с CD30-положительными нелимфоматозными злокачественными новообразованиями. http://www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01461538. Идентификатор: NCT01461538. По состоянию на 13 марта 2014 г.

28. Олбани К., Фельдман Д. Р., Гарбо Л. Е., Эйнхорн Л. Х. Противоопухолевая активность брентуксимаб ведотина в CD30-положительных рефрактерных опухолях половых клеток. Дж. Клин Онкол . 2013; 31 (приложение 6): 327.

29. ClinicalTrials.gov. Брентуксимаб ведотин (SGN-35) в качестве лечебного средства для лечения CD30-положительных опухолей половых клеток.http://www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01851200. Идентификатор: NCT01851200. По состоянию на 13 марта 2014 г.

30. Ким Й.Х., Уиттакер С., Даммер Р. и др. Фаза 3 исследования брентуксимаб ведотина по сравнению с выбором врача метотрексата или бексаротена у пациентов (пациентов) с CD30-положительной (CD30 +) кожной Т-клеточной лимфомой [ICML abstract 572]. Гематол Онкол . 2013; 31 (приложение 1).

Общие обсуждения

Eduardo M. Sotomayor, MD В дискуссиях о CD30 всегда возникает вопрос о том, как иммуногистохимия сравнивается с проточной цитометрией.Есть очень хорошие антитела и к тому, и к другому. Что вы думаете о различиях?

Кен Х. Янг, доктор медицины, доктор философии Мы сравнили оба этих метода у пациентов с острым миелогенным лейкозом и острым лимфобластным лейкозом, и в целом они дали очень согласованные результаты. Однако у нас очень мало образцов от пациентов с лимфомой, доступных для анализа проточной цитометрией, потому что иммуноокрашивание является частью регулярного обследования.

Eduardo M. Sotomayor, MD Как насчет пациентов с фолликулярной лимфомой или ALCL с поражением костного мозга?

Кен Х.Young, MD , PhD В этой ситуации мы могли бы провести как проточную цитометрию, так и иммуноокрашивание.

Эдуардо М. Сотомайор, доктор медицины Вы предпочитаете одно другому у пациентов с В-клеточными лимфомами?

Кен Х. Янг, доктор медицины, доктор философии В академической среде, где есть доступ к опытному гематопатологу, проточная цитометрия выполняется намного быстрее, с типичным временем обработки около 5 часов. Напротив, иммуноокрашивание может занять от 1 до 2 дней.Относительное время для обоих больше в условиях сообщества, поскольку эти лаборатории обычно отправляют эти образцы в референс-лабораторию (в случае проточной цитометрии) или в ближайший академический центр (в случае иммуноокрашивания), но ответ остается то же самое — проточная цитометрия имеет более быстрое время обработки. В общем, проточная цитометрия будет предпочтительнее не только потому, что она дает более быстрый ответ, но и потому, что она гораздо более количественная, чтобы обеспечить процент положительных клеток в определенной группе клеток.

Eduardo M. Sotomayor, MD Как мы уже обсуждали, активация CD30 (как и других TNFR) может оказывать плейотропные эффекты в клетках. Учитывая эту активность, я обнаружил, что данные о пациентах с диффузной большой В-клеточной лимфомой с вирусом Эпштейна-Барра очень интересны. ¹ Похоже, что пациенты с диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомой, положительной как по CD30, так и по вирусу Эпштейна-Барра, имеют плохой исход.

Кен Х. Янг, доктор медицины, доктор философии Да, эта специфическая группа пациентов с диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомой имеет более низкую выживаемость.Результат становится намного лучше у пациентов с экспрессией CD30, отрицательных по вирусу Эпштейна-Барра.

Эдуардо М. Сотомайор, MD Изучили ли вы различные пути передачи сигналов, связанные с CD30, в этих двух условиях?

Кен Х. Янг, доктор медицины, доктор философии У меня нет, но такое исследование было бы очень ценным. Мы оценили профиль экспрессии генов и проанализировали различия между этими двумя группами по нескольким критическим биомаркерам и транслокациям, связанным с лимфомой. ² Эти исследования действительно предоставили доказательства того, что 2 сигнальных пути, NF-κB и JAK-STAT, значительно различаются в этих 2 условиях. В отдельном исследовании мы обнаружили, что экспрессия STAT3 коррелирует с плохой выживаемостью. ³ Однако мы не оценили, является ли STAT3 специфическим сигнальным путем, который связан или регулируется экспрессией CD30. Недавнее исследование секвенирования всего экзома, проведенное моей командой, показывает геномные различия между этими двумя группами лимфомы.

Eduardo M. Sotomayor, MD При заболевании, вызванном вирусом Эпштейна-Барра, можно предположить, что вирусная инфекция управляет экспрессией CD30. В этом подмножестве NF-κB становится сверхактивным, что дает клеткам преимущество в выживании. Интересно, подавлены ли в этих клетках пути апоптоза?

Кен Х. Янг, доктор медицины Мы еще не рассматривали это понятие. Независимая активация генов апоптоза, таких как гены семейства Bcl-2, может происходить или не происходить.

Eduardo M. Sotomayor, MD Оценивали ли вы экспрессию CD30 и результаты при вирусных Т-клеточных лимфомах?

Кен Х. Янг, доктор медицины, доктор философии Исходы Т-клеточной лимфомы до сих пор остаются спорными. Например, французское исследование показало, что выживаемость среди CD30-положительных Т-клеточных лимфом несколько выше по сравнению с их CD30-отрицательными аналогами. ⁴ Другие исследования демонстрируют, что экспрессия CD30 является плохим прогностическим фактором у пациентов со злокачественными новообразованиями, включая Т-клеточный лейкоз / лимфому взрослых, NK-лимфому и Т-клеточную лимфому, ассоциированную с энтеропатией. ⁵ Роль и прогностическое влияние экспрессии CD30 в различных подтипах Т-клеточной лимфомы следует оценивать независимо из-за различий в клеточном происхождении, биологии, фенотипе, геномике и ответе на лечение.

Eduardo M. Sotomayor, MD Таким образом, кажется, что в целом CD30-положительные вирусно-зависимые лимфомы имеют плохой результат.

Кен Х. Янг, доктор медицины, доктор философии Правильно. Кроме того, есть доказательства того, что экспрессия CD30 является плохим прогностическим показателем у некоторых пациентов с трансформированной или рецидивирующей злокачественной лимфомой высокой степени злокачественности.Однако никаких надежных исследований не проводилось. Моя команда завершит такие исследования у пациентов с рецидивирующими и трансформированными лимфомами высокой степени злокачественности.

Эдуардо М. Сотомайор, доктор медицины Интересно, что вызывает экспрессию CD30 у пациентов с трансформированной болезнью.

Кен Х. Янг, доктор медицины Это важный и интересный вопрос, на который пока нет ответа. Например, трансформированная диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома может возникать из фолликулярной лимфомы или других В-клеточных лимфом низкой степени злокачественности.Инактивация генов-супрессоров опухолей и активация онкогенов из-за геномных дефектов и / или эпигенетической дисрегуляции может привести к аномальной трансдукции сигнального пути CD30.

Эдуардо М. Сотомайор, MD Вы когда-нибудь изучали корреляцию с экспрессией CD30 при крупнозернистом лимфоцитарном лейкозе?

Ken H. Young, MD Да, наше предварительное исследование нескольких пациентов с Т-клеточной крупнозернистой лимфоцитарной лейкемией показало, что экспрессия CD30 не наблюдалась при этом типе низкосортной, вялотекущей Т-клеточной лимфомы / лейкемии.Важно подтвердить это открытие на относительно большой группе пациентов.

Эдуардо М. Сотомайор, доктор медицины На заседании Американского общества гематологов в 2013 году были представлены данные о применении брентуксимаб ведотина для лечения пациентов с рецидивирующей или рефрактерной CD30-положительной неходжкинской лимфомой. ⁶ В этой группе около 50 пациентов имели диффузную В-клеточную лимфому. Экспрессия CD30 была довольно вариабельной среди этих пациентов: только 10% показали высокую экспрессию, а многие пациенты показали только 10%, 20% или 30% положительных результатов.Общая частота ответа составила 42% среди пациентов с диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомой, и исследователи пришли к выводу, что ответы могут наблюдаться при различных типах экспрессии CD30. Например, были свидетельства того, что некоторые пациенты с неопределяемым уровнем CD30, тем не менее, достигли ответа на лечение. Это открытие вызывает много вопросов.

Кен Х. Янг, доктор медицины , доктор философии Да, есть понимание, что брентуксимаб ведотин также может быть эффективным у некоторых пациентов с CD30-отрицательными лимфоидными злокачественными новообразованиями.Механизм этой деятельности неизвестен и заслуживает дальнейшего изучения.

Эдуардо М. Сотомайор, доктор медицины Каковы потенциальные причины, по которым предположительно CD30-отрицательный пациент ответил бы на лечение брентуксимаб ведотином?

Кен Х. Янг, доктор медицины, доктор философии Одна из возможностей состоит в том, что это ложноотрицательный результат и что у пациента вместо этого может быть высокий уровень растворимого CD30 в крови. Другое объяснение состоит в том, что пациент действительно CD30-отрицательный, но все еще может реагировать на брентуксимаб ведотин через другой сигнальный путь или биологический механизм.Взаимодействие брентуксимаб ведотина с субоптимальными антигенами CD30 на поверхности клеток лимфомы может быть достаточным для проявления терапевтического эффекта. Также возможно, что брентуксимаб ведотин может проявлять свою регулирующую функцию и терапевтическое действие на компоненты микросреды опухоли, включая макрофаги, мезенхимальные клетки, цитокины и хемокины, а также на стромальный матрикс.

Eduardo M. Sotomayor, MD Один из механизмов может заключаться в том, что конъюгат антитело-лекарство связывает растворимый CD30, что приводит к образованию специфического комплекса, который может стимулировать какой-то ответ.Брентуксимаб ведотин очень специфичен, и до сих пор нет данных о побочных эффектах. Я думаю, что это открытие поднимает вопрос о том, как определить CD30-отрицательный статус. Действительно ли эти пациенты CD30-отрицательны, или есть ошибка или артефакт, присущий современным методам обнаружения CD30?

Кен Х. Янг, доктор медицины , доктор философии Да, может быть, есть некоторые ограничения, из-за которых биопсия не может быть действительно репрезентативной для болезни пациента, по крайней мере, с точки зрения экспрессии CD30.Обычно мы определяем окрашивание менее 20% как CD30-отрицательное при диффузной большой B-клеточной лимфоме. При других типах лимфомы, таких как Т-клеточная лимфома и NK-клеточная лимфома, пороговое значение следует устанавливать независимо в любом конкретном исследовании.

В некоторых случаях экспрессия CD30 может быть в небольшом количестве лимфомных клеток, но процент относительно невелик. В проектах лимфомы любого типа пороговое значение экспрессии CD30 следует устанавливать независимо в зависимости от ответа на лечение и выживаемости.Анализы с использованием рабочих кривых приемника и графиков X-мозаики обычно используются и принимаются в области исследований. Кроме того, когда конкретное антитело к CD30 используется для иммуногистохимического окрашивания, неизвестно, присутствует ли какая-либо мутация в сайте связывания антитела, которая отменяет взаимодействие антитела CD30. Такие явления наблюдались в иммуноокрашивании BCL2, где мутации обнаруживаются в сайте эпитопа, связывающего антитело BCL2, что вызывает низкую частоту положительного окрашивания. Для решения этого вопроса, возможно, потребуется изучить мутационный анализ гена CD30 при соответствующих типах рака.

Eduardo M. Sotomayor, MD Как насчет случая диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы, при которой менее 20% окрашивания CD30 в лимфатическом узле? По вашему определению это выражение будет считаться отрицательным. Но что, если у этого пациента также было поражение костного мозга, которое показало высокий уровень экспрессии CD30 в злокачественных В-клетках?

Кен Х. Янг, доктор медицины, доктор философии Тогда мы будем считать пациента CD30-положительным. В патологии и диагностической практике, когда конкретная экспрессия антигена отличается в разных участках поражения раком, более высокая экспрессия обычно используется в качестве репрезентативного значения.Однако мы не видели ни одного из этих случаев в нашей серии исследований; у большинства пациентов с диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомой, которых мы включили в исследование, был проведен анализ проточной цитометрии костного мозга, который не показал вовлечение. Ваше мнение о расхождении между образцами у одного и того же пациента важно, и этот феномен еще не рассматривался. Из исследований биологии рака мы узнали, что микросреда опухоли, которая включает макрофаги, мезенхимальные клетки, стромальный матрикс, цитокины и хемокины, может способствовать экспрессии биомаркеров, устойчивости к лекарствам и прогрессированию рака.

Мне также любопытно, каков результат для пациентов с окрашиванием CD30 менее 20%. Например, меняется ли результат для пациентов с диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомой с 1% или 3% окрашиванием по сравнению с 18% или 19% окрашиванием? Мы не анализировали количественно и не сравнивали эти группы друг с другом, но, возможно, стоит изучить их более подробно.

Eduardo M. Sotomayor, MD Есть ли корреляция между экспрессией CD30 в лимфатических узлах и активностью ПЭТ?

Кен Х.Young, MD , PhD Мы не изучали этот важный вопрос у пациентов с первичной лимфомой, а также не исследовали, коррелирует ли экспрессия CD30 с рентгенографическими данными, отклонениями клинической химии, рецидивом или статусом прогрессирования. Когда ПЭТ и рентгенологические подходы обычно используются для определения стадии лимфомы и диагностики, это исследование будет важным для выполнения. Однако мы можем анализировать пациентов с первичной лимфомой de novo отдельно от пациентов с трансформацией и рецидивов.У пациентов с рецидивирующей лимфомой, которые в прошлом проходили несколько схем лечения, биомаркеры и рентгенологические оценки могут быть сложными и должны интерпретироваться с осторожностью.

Благодарности

Д-р Сотомайор является докладчиком программы SOLAR и участвовал в работе консультативных советов, спонсируемых Seattle Genetics. Доктор Янг получил поддержку от Университета Техасского онкологического центра им. М. Д. Андерсона в рамках гранта на институциональные исследования, награды за программу научных исследований в рамках специализированных программ передового опыта в области лимфомы (SPORE) доктора медицины Андерсона и награды за программу научных исследований SPORE от доктора медицины Андерсона.Он также частично поддерживается грантами Национального института рака и Национальных институтов здравоохранения (R01CA138688, 1RC1CA146299, P50CA136411 и P50CA142509).

Список литературы

1. Хорошо CY, Папатомас Т.Г., Медейрос Л.Дж., Янг К.Х. ВЭБ-положительная диффузная В-крупноклеточная лимфома пожилых людей. Кровь . 2013; 122 (3): 328-340.

2. Ху С., Сюй-Монетт З.Й., Баласубраманьям А. и др. Экспрессия CD30 определяет новую подгруппу диффузной крупноклеточной B-клеточной лимфомы с благоприятным прогнозом и отличительной сигнатурой экспрессии генов: отчет международного исследования программы DLBCL Rituximab-CHOP Consortium Program Study. Кровь . 2013; 121 (14): 2715-2724.

3. Чжэн В., Медейрос Л.Дж., Янг К.Х. и др. Экспрессия CD30 при остром лимфобластном лейкозе по данным анализа проточной цитометрии. Лимфома лейка. 2014; 55 (3): 624-627.

4. Bisig B, de Reyniès A, Bonnet C и др. CD30-положительные периферические Т-клеточные лимфомы имеют общие молекулярные и фенотипические особенности.