Профиль уд и сд: Виды профилей и деталей для конструкций из гипсокартона

Виды профилей и деталей для конструкций из гипсокартона

Профили изготавливаются из оцинкованной стали. Толщина профиля составляет 0,5-0,6 мм. Если планируется использование профилей толщиной 0,5 мм, то нужно знать, что такой профиль значительно ослабляют жесткость каркаса, при этом  шаг монтажа профиля должен составлять 40 см (при стандарте шага 60 см для стеновых конструкций). Что составляет разницу 50%, при минимальной разнице в цене.

Профиль монтажа гипсокартонных конструкций. Подразделяются на несущие «С» образные и направляющие «U» образные.

Несущие профили используются для крепления на них гипсокартонных листов и подразделяются на:

• CD– облицовочные и потолочные
• CW– стеновые и перегородочные

Направляющие профили применяют для стабилизации и выравнивания в них несущего профиля и подразделяются на:

• UD– направляющий для CD профиля
• UW — направляющий для CW профиля

CD Профиль

CD 60*27*L mm, L=1. 14; 2.6; 3.0; 3.5; 4.0 m
	Примечание: CD профиль предназначен для формирования каркаса подвесных потолков и облицовки стен. Применяется для устройства каркасов подвесных потолков, облицовок и других конструкций. Как правило, используется совместно с направляющим UD профилем.
Расход: Потолок из гипсокартона на одноуровневом металлическом каркасе: Норма расхода на 1 м2 — 2,9 пог.м. Потолок из гипсокартона на двухуровневом металлическом каркасе: Норма расхода на 1 м2 — 3,2 пог.м. Облицовка из гипсокартона на каркасе из профиля CD: Норма расхода на 1 м2 — 2,0 пог.м.

UD Профиль

UD 28*27*3000 m
	Примечание: Служит направляющим элементом для профилей CD 60/27 при монтаже каркаса подвесного потолка, а также облицовки стен. Применяется для устройства каркасов подвесных потолков, облицовок и других конструкций на основе гипсокартона. При монтаже каркаса подвесного потолка профиль UD крепится по периметру помещения на стенах. В случае установки каркаса облицовки профиль крепится к полу и потолку.
Расход: Потолок из гипсокартона на одноуровневом металлическом каркасе: Норма расхода на 1 м2/длина периметра. Облицовка из гипсокартона на каркасе из профиля CD: Норма расхода на 1 м2 / 0,8 пог.м.

 

CW Профиль

CW 50; 75; 100*50*L mm, L=2.6; 2.75; 3.0; 3.5, 4.0; спец.
Примечание: Стоечные профили имеют С-образную форму и служат, как правило, в качестве вертикальных стоек каркасов, предназначенных для гипсокартонных перегородок и облицовок.  Применяется для устройства каркасов межкомнатных перегородок, облицовок и других конструкций на основе гипсокартона. Обычно используется совместно с направляющим UW профилем одного типоразмера.
Расход: Перегородка из гипсокартона с обшивкой на каркасе из профиля CW и UW: UW, Норма расхода на 1 м2 / 0,7 пог. м. CW, Норма расхода на 1 м2 / 2,0 пог. м. Облицовка из гипсокартона на каркасе из профиля CW и UW: UW, Норма расхода на 1 м2 / 1,1 пог. м. CW, Норма расхода на 1 м2 / 2,0 пог. м.

UW Профиль

UW 50; 75; 100*40*3000
Примечание: Металлические UW профили имеют “U”-образную форму и служат в качестве направляющих элементов для стоечных профилей, а также для устройства перемычек между ними в каркасах перегородок и облицовок. Применяется для устройства каркасов межкомнатных перегородок, облицовок и других конструкций на основе гипсокартона. Как правило, служит направляющим элементом для стоечного профиля соответствующего типоразмера. Монтируются в паре с соответствующими по типоразмеру профилями CW.
Расход: Перегородка из гипсокартона с обшивкой на каркасе из профиля CW и UW: UW, Норма расхода на 1 м2 / 0,7 пог. м. CW, Норма расхода на 1 м2 / 2,0 пог. м. Облицовка из гипсокартона на каркасе из профиля CW и UW: UW, Норма расхода на 1 м2 / 1,1 пог. м. CW, Норма расхода на 1 м2 / 2,0 пог. м.

UA Профиль. Усиленный для дверных проемов, санузлов. 2.0мм

UA 50; 75; 100*L, L=3.0, 4.0m

Примечание: Профили UA используются для формирования дверных проемов и для крепления тяжелого оборудования санузла. Профили UA могут монтироваться в помещении как несущие опоры (для крепления электрических бойлеров, лабораторных шкафов или классных досок). Допустимая нагрузка составляет 1,5 кН на один метр стены. Профили UA обеспечивают возможность создания больших по размеру пролетов «защемленных» потолков и увеличения расстояния между подвесками для потолочной системы.

CD 01	CD 05	CD 09	Амортизационная лента
Служит для соединения (наращивания) потолочных профилей и применяется с профилем CD 60/27.	Применяется с тягой подвеса для крепления профилей CD  60/27. При монтаже допускает регулировку положения профилей по высоте.	Предназначен для крепления несущих профилей к основным профилям в подвесном потолке. Применяется с профилем CD 60/27	Это амортизационная лента, которая применяется для плотного соединения металлических профилей каркаса облицовок и перегородок с несущими строительными конструкциями в местах примыкания, а также обеспечения требуемой звукоизоляции.
CD 11	CD 12 (CD14)	CDP	SC (SA)
T-образный соединитель. Предназначен для крепления несущих отрезков потолочного профиля к основным профилям в подвесном потолке. Применяется с профилем CD 60/27.	Предназначен для закрепления (подвески) потолочных профилей к несущим конструкциям. Закрепляется на базовом основании анкерным элементом (ж/б потолок) или дюбелем (стена). Потолочный профиль CD 60/27 крепится к подвесу шурупами типа Li.	Предназначен для крепления несущих отрезков потолочного профиля к основным профилям в подвесном потолке. Применяется с профилем CD 60/27.	Используется для подвеса с зажимом. Закрепляется через петлю на базовом ж/б перекрытии анкерным элементом.

Разница между стоечным и направляющим профилем и в чём отличия крепления

Гипсокартонная отделка может быть выполнена двумя способами: с каркасом или же без него. В бескаркасном варианте использования, гипсовый материал крепят с помощью клея, а в качестве основания выступают сами стены. Такая технология имеет массу ограничений в применении, и использовать ее возможно довольно редко.
Готовый смонтированный каркас из профилей

Монтаж ГКЛ на каркас, наоборот, более универсален. Собрать основание для дальнейшей обшивки возможно практически в любых ситуациях. Для этого нужно лишь подобрать соответствующие типы материалов и придерживаться технологических требований.
Основой любой гипсокартонной конструкции являются два типа деталей — профиль стоечный и направляющий. Именно с помощью таких реек можно изготовить сложные комплексы или просто отделать комнату.
Существующие виды профилей

Так выглядит направляющий профиль
Итак, что следует знать о материалах для каркаса под гипсокартон? Вернуться к оглавлению

Полное содержание материала

Направляющий профиль, описание и использование

В сборке каркасных оснований для гипсокартонной обшивки могут использоваться различные типы направляющего профиля. Данный вариант делится на две группы – для отделки стен или потолка и для монтажа простенков со стенами. Их различают по маркировкам, которые обозначают назначение рейки.

Схематичное изображение направляющего профиля

Итак, отличают следующие типы направляющих профилей:

• UD-28 (отечественная номенклатура направляющий ПН-профиль). Предназначен для сборки каркасов, отделки стен и потолков. Имеет стандартные параметры: ширина 28 мм, высота полок 27 мм, длина 3000 или 4000 мм. Материал рейки — сталь толщиной 0,5-0,6 мм. В обязательном порядке металлический профиль имеет цинковое защитное покрытие, предотвращающее коррозию;
• UW-50, 75, 100. Число в маркировке обозначает ширину рейки. Такой профиль предназначен для установки в качестве основания под стойки, при сборке каркаса стен и различных простенков. Ширина 50, 75 или 100 мм, высота полок стандартна для всех видов – 40 мм, длина 3000-4000 мм, толщина стальных стенок 0,5-0,6мм. А также имеет антикоррозионное покрытие из цинка.Таблица существующих видов профилей UW 50

Стоит знать, что довольно часто направляющие профили заменяют арочные типы реек, для создания криволинейных форм арок, куполов и ярусов подвесных потолков. Для чего их боковые полки надрезают ножницами по металлу, и изгибают рейку, получая необходимые обводы конструкции.

Без подобных профилей невозможно собрать каркас под гипсокартон, заменить их нечем. Надежное крепление и правильная установка таких реек определяет качество всей дальнейшей отделки или стены.

Вариант конструкции каркаса под гипсокартон


Однако собрать каркас невозможно без стоечных вариантов профиля, которые также имеют свои подвиды в зависимости от назначения.

Вернуться к оглавлению

Стоечный профиль, параметры и использование

Часто стоечными профилями называют только один вид – CW, однако это не совсем верно, ведь для каркаса стен и потолка потребуется совершенно другой тип металлических реек.
Различают варианты готовых стоек, использующихся в создании основания под гипсокартонную обшивку.
Существующие размеры профиля CW

1. CD профиль (ПП – профиль потолочный в отечественных сокращениях). Несмотря на то, что его называют потолочным, такой вид металлопрофиля применяется для каркасов отделки не только перекрытий, но и стен. Имеет следующие характеристики: ширина 60 мм, высота боковых полок 27 мм, длина 3000-4000 мм. Полки с загибами внутрь паза профиля, а по всей его протяженности имеются ребра жесткости, что при толщине стенок в 0,5-0,6 мм не позволяет рейке изгибаться под нагрузкой. Как и в направляющих аналогах для стоечных вариантов обязательно наличие покрытия с цинка.Так выглядит CD профиль
2. CW-50, 75, 100 (ПС – профиль стоечный). Обычно этот тип профиля называют стоечным. Его используют при сборке каркасов простенков и стен, обшиваемых в дальнейшем листами гипсокартона. Цифры в маркировке обозначают ширину рейки, высота полок стандартна для всех – 50 мм. Они, как и в предыдущем варианте рейки, с загибом внутрь. Толщина стенок 0,5-0,6 мм, дополнительное усиление придают ребра жесткости по всей протяженности профиля. В наличии антикоррозионное цинковое покрытие.

Стоит знать, что латинские и русские маркировки обозначают одни и те же наименования. В первом случае используется система обозначений, разработанная компанией Knauf, вторая по стандартам отечественных производителей. И нет никакой разницы покупая СD или ПН-профиль, которые имеют одинаковые размеры и назначение. Смотрите в видео процесс сборки перегородки с помощью стоечных и направляющих профилей.

Вернуться к оглавлению

Сравнение стоечных и направляющих профилей

Разница между стоечными и направляющими профилями очевидна. Они имеют разное предназначение, а соответственно и совершенно отличимые способы и материалы крепления. Что общего имеют металлические детали для каркаса? В чем их более подробные отличия?

Чертеж в размерами сечения профиля

Общие параметры направляющих и стоечных реек

Естественно все детали каркаса должны иметь точные посадочные размеры, образовывая прочные соединения, не имеющие никаких люфтов. Также все профили стандартизированы под использование их в помещениях. Эти требования определяют некоторые общие параметры направляющих и стоечных профилей, несмотря на их отличимые назначения.

• Длина. Все наименования реек имеют длину 3000 либо 4000 мм. Это диктуется не только общим производством, но и параметрами помещений. Жилые комнаты часто имеют ширину 3 метра, при длине 4-5 м. Но, необходимую протяженность легко можно укоротить или добавить;
• Высота полок. Профили для отделки стен или потолков, а также сборки простенков из ГКЛ, имеют стандартную высоту полок (смотреть выше). Это позволяет легко монтировать стойки каркаса в направляющие, без каких-либо проблем и тем более люфтов;Вариант конструкции каркаса полок из гипсокартона
  
• Толщина стенок. Она также одинакова во всех вариантах деталей каркаса под гипсокартонную обшивку. 0,5-0,6 миллиметров вполне достаточно для получения прочной металлической детали;
• Антикоррозионное покрытие. Обязательно присутствует на всех типах профиля, так как, несмотря на назначение, он будет подвергаться окислительным процессам. Пример антикоррозийного покрытия профиля
  

Однако имеется много отличий у направляющего и стоечного типов профиля, все-таки они предназначены под выполнение своих функций.

• Ширина. Ширина разная для профилей, которые идут на отделку стен, сборку простенков. В последнем случае такая характеристика определяет будущую толщину конструкции. Можно собрать стены на основе металлического каркаса 50, 75 или 100 мм шириной;
• Сечение. У стоечных профилей поперечное сечение имеет сложную форму, присутствуют ребра жесткости, а также загибы полок, сделанные для упрочнения рейки. Ведь такие детали будут подвергаться более значительным нагрузкам в сравнении с направляющими;Таблица существующих вариантов сечения профиля под гипсокартон
• Способы монтажа. Наибольшее различие между рейками для закладки основания каркаса и его стойками. Направляющие монтируются непосредственно на несущие поверхности крепежами, вбитыми сквозь металл изделия. Они создают надежную опору. В отличие от них стойки большей частью висят в воздухе, опираясь лишь на направляющие своими концами и поддерживаемые подвесами с поперечными рейками. Но, чтобы получить прочное основание под гипсокартон для обоих типов профиля, нужно создать необходимое количество точек крепления;Варианты крепления профиля на потолокПример крепления профиля к стене
• Типы крепежей. Отличается и технология монтажа, которая требует наличие соответствующего крепежного материала. Направляющие профили, как правило, крепятся дюбелями — гвоздями, вбиваемыми сквозь просверленные в рейке отверстия. Стоечные виды соединяются с другими деталями каркаса саморезами по металлу: пресс шайбами или клопами. А также такой тип рейки невозможно установить без дополнительных деталей – подвесов (прямых, струнных, скользящих и прочих).
  Схема соединения профиля между собой

Как крепятся направляющие и стоечные профили

Закрепить направляющие профили довольно просто. Схема монтажа следующая:

• на участке работ делается разметка, с обязательным точным контролем по строительному уровню;
• на метки укладываются направляющие профили, в которых с шагом в 350-400 мм сверлятся отверстия под крепеж;
• дюбели — гвозди (либо другие подходящие метизы), вбивают в полученные отверстия молотком либо ударной дрелью или перфоратором.Виды дюбелей для крепления профиля

Основание готово, после чего переходят к установке стоек каркаса.

1. Готовится разметка (при отделке стен стойки монтируют по 3 шт. на 1 лист ГКЛ).
2. На поверхностях стен или потолка крепятся соответствующие подвесы.Пример монтажа подвесов на стены
3. Стойки вставляют в направляющие, с последующей фиксацией концов реек саморезами.Поэтапный процесс крепления стоек каркаса
4. Подвесы подгибаются и закрепляются к стойкам пресс-шайбами или клопами.
   

Иногда каркас под гипсокартон изготовляют из древесины, выбирая подходящий вариант бруса или реек. Однако подобный материал очень капризен и по всем требованиям уступает металлическим направляющим и стоечным профилям, которые позволяют собрать легкое, прочное и долговечное основание под отделку ГКЛ.

CD, UD, CW, UW. Цена оптовая, розничная

Сколько весит профиль для гипсокартона?

Стоечный профиль:

Размеры профиля, мм	Кг/1м.п.
50x50x0,5	0,73
65x50x0,5	0,81
75x50x0,5	0,85
100x50x0,5	0,97

Направляющий профиль

Размеры профиля, мм	Кг/1м.п.
28х27×0,5	0,4

Потолочный профиль

Размеры профиля, мм	Кг/1м. п.
60x27x0,5	0,6

Современные технологии в строительстве дают возможность без всяких проблем создавать различные варианты конструкций из гипсокартона. Функции основного крепежного и направляющего элемента и при монтаже гипсокартонных плит  выполняют профили, при помощи которых и монтируются различные каркасные конструкции. Именно они обеспечивают многофункциональность, надежность и простоту любого сооружения.

Профили для гипсокартона применяется для построения каркасов и конструкций, монтажа перегородок и подвесных потолков. Это высокопрочный, экономичный и надежный материал, который завоевал большую популярность у строителей. Современные профили для гипсокартона производятся из стали, а затем оцинковываются, что обеспечивает устойчивость металла к атмосферным воздействиям.  

При производстве профилей используется сталь 0,37 — 0,55 мм. толщиной.  Толщина стали играет очень важную роль при монтаже, и важна в зависимости от назначения конструкции.

Профиль для гипсокартона виды

Для монтажа профилей к стенам используется CD и UD профиль. CW и UW – используется для создания перегородок.

​Стандартная длинна 3 или 4 м. Размер:

    Это несущий потолочный или пристенный оцинкованный профиль. Он используется для монтажа потолочно-стеновых конструкций из гипсокартонных плит – для формирования каркасов под облицовку потолков, стен и перегородок. Профили этого типа применяются в качестве вертикальных стоек. Монтируются они в комбинации с подходящими по размеру направляющими и вставляются в горизонтальные UD профили. Из них можно создавать различные криволинейные и арочные конструкции, что дает возможность реализовывать самые смелые дизайнерские решения. 

 

​    Это направляющий оцинкованный профиль – в него вставляется CD профиль.  Он используется при создании потолочных и напольных направляющих для стоечных профилей при монтаже гипсокартонных плит. Применяется для построения потолочно-стеновых конструкций: подвесных потолков, перемычек в каркасах, пристенных сооружений.  

​

 

 

​​​Стандартная длинна 3 или 4 м. Размер:

    Это стоечный С-образныйоцинкованный профиль. Он используется для создания межкомнатных  перегородок и служит в качестве вертикальной стойки  для скрепления гипсокартонных плит.  Монтируется в паре с подходящим по параметрам направляющим UW профилем. 

 

 

​Стандартная длинна 3 или 4 м. Размер:

    Это оцинкованный направляющий профиль.   Используется в роли направляющего для стоечного профиля при монтаже каркаса, а также для создания перемычек.  Применяется, в основном, для устройства межкомнатных гипсокартонных перегородок и монтируется в паре с подходящим CW профилем.

 

 

Виды профилей для гипсокартона CD, UD, СW и различия между ними по характеристиками и назначению

Полотна гипсокартона нуждаются в защите каркасными изделиями по торцевым сторонам (или по так называемому хребту). Усиление делается при помощи специального металлического профиля, предварительно оцинкованного.

В зависимости от ориентации будущей конструкции и ее особенностей, выбирается определенный вид крепежного элемента. Профили для гипсокартона в широком ассортименте представлены в строительном магазине https://zaporozhye.kub.in.ua/gipsokarton-i-profil/profil-dlja-gipsokartona/.

Что такое профиль для гипсокартона?

Профилем для полотна гипсокартона называют укрепление по периметру, выполняемое из холоднокатаного стального листа. Разновидность профиля определяет специальная маркировка, по ней можно понять тип и форму изделия.

Классификация металлического профиля для гипсокартона подразумевает следующие наименования:

• CD профиль стоечный
• CW для конструирования перегородок
• UD направляющий, используется в обшивке
• UW перегородочный металлический каркас
• комбинированный гибкий, или арочный профиль.

Применение в строительстве и характеристики

• CD профиль применяется в конструкциях горизонтальной ориентации, а также при монтаже потолочных полотен. Данный тип сооружений может классифицироваться как несущий, поэтому при сборке важно использовать качественный материал и надежные крепления. Оптимальные размеры изделия и рациональное строение позволяют использовать пространство строго в соответствии с габаритами гипсокартона.
• CW профиль используется в монтаже перегородочных объектов. Изделие может иметь дополнительные насечки, что способствует легкой работе в коммуникационными материалами. Допустимо наличие добавочного ребра жесткости, создающего загнутый край металла.
• UD каркас для гипсокартона, представляет собой обшивочный материал, действующий в качестве направляющего звена. Данная категория используются по общему периметру обрабатываемой площади.
• UW профиль применяется на начальном этапе создания перегородочных конструкций. Линейка изделий подразумевает различные параметры ширины и размера, поэтому этот материал пользуется спросом.

Арочные изделия отличаются гибкостью и возможностью в некотором радиусе менять угол, по классификации бывает вогнутый и выпуклый вариант. Профиль изогнутого типа используют в создании сложной конструкции, где присутствуют округления и криволинейные плоскости. Разновидности определяют степень изгиба и ширину, длину изделия. Несмотря на эластичность, арочные профили такие же прочные и надежные, как ровные аналоги.

Оборудование для производства профиля под гипсокартон CD. Cтанок для профиля гипсокартона CD

Рейтинг:   / 0

Линия предназначена для профилирования СD профиля из тонколистовой оцинкованной стали толщиной 0,4-0,5 мм. Высокое качество готовой продукции обеспечивается автоматической системой управления и слежения за точностью технологического процесса, что важно для среднего и малого бизнеса.

Комплектность:

 

•  Разматыватель — 1 шт.
•  Профилегибочный стан — 1 шт.
•  Отрезное устройство – 1 шт.
•  Приёмный стол – 2 шт.
•  Шкаф управления – 1 шт.

 

Параметры

 

№	Наименование параметра или размера	Величина или параметр
1	Обрабатываемый материал	Сталь тонколистовая оцинкованная с непрерывных линий по ГОСТ 14918 (марка стали 08 КП по ГОСТ 9045-80, применение ХП)
2	Толщина обрабатываемого материала	0,4-0,5 мм.
3	Тип производимого профиля	CD
4	Ширина заготовки	123 мм.
5	Скорость профилирования	10 м.пог/мин
6	Точность отрезки	± 10 мм
7	Тип профилегибочного стана	Мобильный
8	Тип отрезного устройства	Пневматический
9	Тип разматывателя	Стоечный, неприводной
10	Грузоподъёмность разматывателя	1500 кг
11	Режим работы	Полуавтомат
12	Привод	Электромеханический, червячный мотор-редуктор
13	Передача	Цепная
14	Максимальная длина профиля, принимаемого приёмным столом	4000 мм.
15	Шкаф управления	Обеспечивает автоматическую работу линии после заправки материала в профилегибочный стан и указания длины изготавливаемого профиля
16	Обслуживающий персонал	2 чел.
17	Габаритные размеры линии*	11720х400х1400 мм
18	Установленная мощность линии*	1,5 кВт
19	Масса линии*	800 кг

 

Схема

 

 

 

Эскизы

 

                                 

Фото

 

 

Видео

 

Сегодня, когда рынок строительных технологий развивается активно как никогда, многие фирмы стремятся производить высококачественную продукцию. Данное стремление во многом продиктовано двумя важными и взаимосвязанными необходимостями:

• Создавать конкурентоспособный товар на рынке;
• Посредством производства конкурентоспособного товара продвигать собственную торговую марку.

Почему отечественному производителю не выгодно закупать дорогостоящее западное оборудование?

Серьезным аргументом против приобретения профессионального оборудования западного производства станет его цена. Скажем, хороший станок для профиля гипсокартона CD, производства одной из видных западных промышленных марок, стоит немалых денег, ввиду чего, любому производителю, ради компенсации затрат на подобное оборудование необходимо будет осуществить серьезное повышение цен на производимую им продукцию.

Осознав необходимость быстрого и эффективного преодоления данной проблемы, многие производители будут искать качественное оборудование для производства профиля под гипсокартон по доступной цене. Изучив широкий спектр предложений, многие производители придут к достаточно рациональному выводу – необходимости купить оборудование для производства профилей для гипсокартона российского производства. Так, компания «Финпрофиль» предлагает широкий выбор высококачественной промышленной техники.

Преимущества техники производства компании «Финпрофиль»

Преимущества такого оборудования:

• Доступная цена;
• Достойное качество, продукция «Финпрофиль» нисколько не уступает по уровню дорогостоящим западным аналогам;
• Наличие гарантийного и послегарантийного обслуживания, широкий спектр сервисных услуг.

Нужна качественная линия производства профилей для гипсокартона? – не тратьте времени зря! Звоните в отдел сбыта и маркетинга компании «Финпрофиль», получайте развернутую консультацию по любым интересующим вас вопросам, покупайте качественное оборудование и производите только высококлассную продукцию!

Профиль для гипсокартона (ГКЛ) CD, CW, UD, UW, UA

Купить профиль для гипсокартона любого вида Вы сможете в интернет-магазине Тривита по выгодной цене.

Габариты профиля отличаются в зависимости от типа. Например, у стоечного профиля, который маркируется литерами CD, размеры могут быть такими:

• Длина — от 2500 мм до 4000 мм.
• Ширина — 60 мм.
• Высота полок — 27-28 мм.

У направляющего профиля для обшивки (UD) другие габариты:

• Длина — 3000 мм.
• Ширина — 27 мм.
• Высота — 28 мм.
• Толщина профиля составляет 0,45 мм, 0,5 мм или 0,55 мм.

Размеры направляющих профилей для перегородок (UW):

• Длина — от 2000 мм до 4000 мм.
• Высота — от 37 мм до 40 мм.
• Ширина – 42, 50, 66, 75, 100, 125, 150 мм.

Габариты перегородочных профилей (CW):

• Длина — от 3000 мм до 4000 мм.
• Высота — от 40 мм до 50 мм.
• Ширина – соответствует ширине профиля UW.

Существуют также арочные профили, которые делятся на вогнутые и выпуклые.

Размеры выпуклых профилей:

• Длина: 2600 мм, 3100 мм и 4000 мм.
• Радиус — от 1000 мм и больше.

У вогнутых профилей длина такая же, а наименьший радиус — 500 мм.

Толщина металла, из которого изготовлен профиль, составляет:

• 0,45 мм.
• 0,5 мм.
• 0,55 мм.
• 0,6 мм.

В интернет-магазине Тривита представлен профиль толщиной 0,45 мм, 0,5 мм и 0,55 мм.

Вес профиля измеряется на один погонный метр. Рассмотрим вес профилей основных типоразмеров:

• 50x50x0,5 мм — 0,73 кг.
• 65x50x0,5 мм — 0,81 кг.
• 75x50x0,5 мм — 0,85 кг.
• 100x50x0,5 мм — 0,97 кг.
• 28х27х0,5 мм — 0,4 кг.

Профиль для гипсокартона стеновой применяется для конструкций каркасов. Отличается широкой классификацией и широкой сферой применения.

Профиль для гипсокартона: виды

В нашем интернет-магазине Вы найдете несколько видов профилей в зависимости от предназначения:

• Профиль для гипсокартона стеновой.
• Профиль для гипсокартона перегородочный.
• Стартовый профиль для гипсокартона.

Маркировка Knauf делит профиль на 4 вида:

Первые буквы обозначают:

• C – стоечный.
• U – направляющий.

Вторая буква обозначает сферу применения:

• W — для обшивки стен.
• D — для потолка.

По форме профили делятся на 3 вида:

• Плоские.
• Угловые.
• Форма швеллера.

Цены на профиль для гипсокартона

Материалом для профиля для гипсокартона служит сталь. Причем чаще всего оцинкованная. В зависимости от функционального назначения применяется толстолистовая или тонколистовая оцинковка.

Рассмотрим более подробно каждый вид профиля для ГКЛ.

Профили для каркаса

Каркас для гипсокартона изготовлен из направляющих профилей для гипсокартона UD (профиль УД). На этот профиль крепится вся система из перегородок и листов гипсокартона. Соответственно, такое изделие изготовлено из толстой марки стали. именно такой материао определяет периметр всей конструкции в целом.

Второй вид для каркаса — CD (профиль СД). Он выполняет несущую функцию. Именно на него крепят гипсокартонные листы, так что и его изготавливают из оцинкованной стали.

Арочный профиль — третий подвид для каркаса. Отличается усиленной перфорацией, которая включает много разрезов и перегородок. За счет этого материал может гнуться в любом направлении для формирования сложного каркаса.

Перегородочные профили

Изделие UW применяется для обшивки конструкции. По этому изделию устанавливают конфигурацию и периметр простенка.

Подвид CW — это элемент, который придает всей конструкции дополнительную жесткость. На него монтируют гипсокартонные листы с обеих сторон.

Крепежные элементы

Для профилей применяется крепежная фурнитура. Она соединяет отдельные конструктивные элементы каркаса и используется для крепления листов гипсокартона. Крепежные элементы бывают 3-х типов:

• Тяги.
• Кронштейны.
• Подвесы.

Купить профили и крепежные элементы с доставкой по всей Украине Вы сможете в Киеве по выгодной цене в интернет-магазине Тривита. Звоните:

Профиль CD эконом 3м в Харькове по низкой цене

Профиль CD эконом длиной 3 метра производится в Украине. Отличается меньшей толщиной металла профиля, в сравнении со стандартными видами профиля данного типа. Профиль CD 60*27 эконом это облегченный бюджетный вариант профиля для легких и небольших конструкций из металлического профиля и листовых строительных материалов, таких как гипсокартон. Облегченный профиль используется с целью экономии денежных средств (данный вид в разы дешевле стандартного профиля толщиной 0,6 мм) и облегчения выполнения монтажных работ, так как гипсокартонный профиль меньшей толщины существенно легче стандартного вида с толщиной металла.

Предназначен для монтажа гипсокартонной конструкции навесного потолка, но в целях экономии часто применяется также для облицовки стен. Применяется профиль CD в паре с направляющим потолочным профилем UD, который крепится к стене по периметру конструкции, а уже в него вставляется и крепится профиль CD. Расстояние между профилями СД устанавливают 40-60 см для устойчивости и стабильности конструкции (расстояние между профилями СД определяется размером листа гипсокартона 120 см, кратное 40 и 60 см). Монтаж профиля к потолочному перекрытию выполняется с помощью анкерного или П-образного подвеса, к которому профиль крепится при помощи специального самореза по металлу  длиной 9,5 мм с острым концом (нет необходимости отдельного сверления металла профиля). Гипсокартон крепится непосредственно к профилю CD саморезами по металлу длиной от 35 мм.

Изготавливают гипсокартонный профиль из цельной стальной ленты методом прокатки на специальном оборудовании с нанесением защитного слоя. Оцинкованное покрытие профиля защищает его от коррозии и воздействия внешних факторов, что положительно влияет на срок эксплуатации и безопасности готовой конструкции.

Купить Профиль CD эконом 3м по низкой цене в Харькове удобно и выгодно на оптовой базе Феникс. Скидки и оптовые цены позволят сэкономить денежные средства. Возможность забрать материалы в день заказа или оформить доставку по Харькову и области сделает покупку простой и выгодной. Также на оптовой базе Феникс широкий выбор сопутствующих товаров для ремонта и строительства, в том числе профиль для гипсокартона и различные виды листовых материалов для отделки внутри и снаружи помещений. Звоните — наши менеджеры ответят на интересующие Вас вопросы о товаре и сопутствующих материалах и помогут оформить заказ.

UD Almería — Профиль клуба 19/20

10 9000 9000 1,32 млн долл. США

1		11 августа 1996 г. (22)			1,32 млн долл. США
—		сен. 22)			440 Тыс.
13		10 июня 1990 г. (29)			$ 358Th.
—		15 декабря 1983 г. (35)			$ 220Th.
—		7 февраля 1995 г. (24)
—		16 марта 2001 г. (18)
24		26 марта 1995 г.
18		19 декабря 1995 г. (23)			$ 1.32 м
—		9 августа 1990 г. (28)			$ 440Th.
15		17 августа 1995 г. (23)			$ 358Th.
—		30 июня 1990 г. (29)			$ 248Th.
22		1 июня 1999 г. (20)			$ 220Th.
3		15 мая 1997 г. (22)			880 долл.
12		3 марта 1998 г. (21)			$ 798Th.
—		27 октября 1984 г. (34)			220 Тыс.
—		13 июня 1997 г. (22)			110тр.
2		11 марта 1996 г. (23)			2,64 млн долл. США
20		1 января 1992 г. (27)	9016	9016	$ 880Толл.
4		8 сен 1987 (31)			523 тыс. Долл. США
—		10 сен 2001 (17)
6		30 марта 1992 (27)			$ 798
8		8 марта 1989 г. (30)			$ 715Th.
—		27 марта 1996 г. (23)			$ 523Th.
14		7 июля 1996 г. (22)			2,64 млн долл. США
23		6 марта 1996 г. (23107)		$ 2.64m
5		2 сентября 1992 г. (26)			$ 715Th.
—		15 апреля 1998 г. (21)			220Толл.
19		14 апреля 1997 г. (22)			2,64 млн долл. США
10		11 мая 1998 г. (21)	1 доллар.98m
7		24 марта 1995 г. (24)			$ 605Th.
—		16 сентября 1997 г. (21)			523 тыс. Долл. США
—		8 января 2000 г. (19)			$ 55Th.
16		16 февраля 1996 г. (23)			$ 1.76m
—		9 декабря 1997 г. (21)			$ 440Th.
—		13 мая 1995 г. (24)			$ 358Th.
31		5 января 2001 г. (18)			1,98 млн долл. США
17		7 июля 1991 г. (27)	9000	9000 715 Тыс.
21		24 июня 1999 г. (20)			1,98 млн долл. США
11
—		6 мая 1995 г. (24)			440 долл.
—		2 июля 1997 г. (21)			$ 358Th.
—		10 апреля 1998 г. (21)			330Толл.
36		17 августа 1998 г. (20)			330Th.
—		27 июня 2000 г. (19)

Рауль Борреро — Профиль менеджера

На этой странице отображаются все трансферы для выбранного игрока. Наряду с датой трансфера, участвующими клубами и комиссией за трансфер он также отображает рыночную стоимость игрока на момент трансфера.

Сезон	Дата	Левый			присоединился			МВ	Комиссия
09/10	01 июля 2009 г.			UD Vecindario			На пенсии	–	–
05. 06	01 июля 2005 г.			Бенидорм			UD Vecindario	–	?
04/05	01 июля 2004 г.			Pájara Playas			Бенидорм	–	?
01/02	01 июля 2001 г.			CyD Leonesa			Пахара Плайяс	–	?
00/01	01 июля 2000 г.			Пахара Плайяс			CyD Leonesa	–	?
98/99	01 июля 1998 г.			SD Beasain			Pájara Playas	–	?
97/98	01 июля 1997 г.			Депортиво Б			SD Beasain	–	?
96/97	01 июля 1996 г.			Cacereño			Депортиво Б	–	?
95/96	01 июля 1995 г.			Поли Эхидо			Cacereño	–	?
94/95	01 июля 1994 г.			CD универсал			Поли Эхидо	–	?
Итого комиссия за перевод:									0

Levante UD »Рекорд против SD Compostela

Segunda División		М.	Вт	D	л	голов
	дома	3	0	1	2	3	:	6
	П2	3	0	1	2	3	:	8
	∑	6	0	2	4	6	:	14
общая		М.	Вт	D	л	голов
	дома	3	0	1	2	3	:	6
	П2	3	0	1	2	3	:	8
	Нейтральное место	0	0	0	0	0	:	0
	∑	6	0	2	4	6	:	14

Для игр, в которых были определены пенальти, счет по истечении 120 минут будет включен в рейтинг

Университет Южной Дакоты —

доллара США

USD Wellness Center групповые занятия фитнесом Бесплатно для участников

Зарегистрируйтесь на Летний учебный курс оздоровительного центра! Учебный лагерь продлится с понедельника 10 мая по среду 23 июня.Это три дня в неделю: понедельник, среда, пятница с 6:00 до 6:50. Если вы одновременно зарегистрируетесь на второй летний учебный лагерь (7 июля — август …

)

USD Wellness Center групповые занятия фитнесом Бесплатно для участников

Зарегистрируйтесь на Летний учебный курс оздоровительного центра! Учебный лагерь продлится с понедельника 10 мая по среду 23 июня.Это три дня в неделю: понедельник, среда, пятница с 6:00 до 6:50. Если вы одновременно зарегистрируетесь на второй летний учебный лагерь (7 июля — август …

)

Kid’s Fit Camp — это энергичный и веселый тренировочный лагерь для детей. Инструкторы проведут тренировки всего тела, которые заставят сердце биться быстрее и стимулируют обмен веществ. Этот лагерь направлен на повышение общего уровня здоровья и физической подготовки детей в веселой, безопасной, позитивающей атмосфере…

Этот 10-недельный онлайн-курс предназначен для ознакомления с лексикой жестового языка семьями, профессионалами и другими членами сообщества. Участники будут изучать разнообразную лексику, которая будет способствовать более четкому общению дома, в классе, на работе …

USD Wellness Center групповые занятия фитнесом Бесплатно для участников

Это еженедельное собрание сотрудников КАОР-FM, 91.1, студенческая радиостанция USD. Приглашаются все студенты, для участия им не обязательно иметь специальность «СМИ и журналистика». Однако они должны быть зарегистрированы в долларах США и иметь ученую степень, чтобы быть частью штата.

USD Wellness Center групповые занятия фитнесом Бесплатно для участников

Зарегистрируйтесь на Летний учебный курс оздоровительного центра! Учебный лагерь продлится с понедельника 10 мая по среду 23 июня.Это три дня в неделю: понедельник, среда, пятница с 6:00 до 6:50. Если вы одновременно зарегистрируетесь на второй летний учебный лагерь (7 июля — август …

)

Kid’s Fit Camp — это энергичный и веселый тренировочный лагерь для детей. Инструкторы проведут тренировки всего тела, которые заставят сердце биться быстрее и стимулируют обмен веществ. Этот лагерь направлен на повышение общего уровня здоровья и физической подготовки детей в веселой, безопасной, позитивающей атмосфере…

Ротари клуб собирается практически каждую среду. Для получения дополнительной информации посетите www.vermillionrotaryclub.org

USD Wellness Center групповые занятия фитнесом Бесплатно для участников

Этот 10-недельный онлайн-курс предназначен для ознакомления с лексикой жестового языка семьями, профессионалами и другими членами сообщества.Участники будут изучать разнообразную лексику, которая будет способствовать более четкому общению дома, в классе, на работе …

USD Wellness Center групповые занятия фитнесом Бесплатно для участников

Зарегистрируйтесь на Летний учебный курс оздоровительного центра! Учебный лагерь продлится с понедельника 10 мая по среду 23 июня. Это три дня в неделю: понедельник, среда, пятница с 6:00 до 6:50.Если вы одновременно зарегистрируетесь на второй летний учебный лагерь (7 июля — август …

)

Генно-инженерные наночастицы, покрытые клеточной мембраной, для направленной доставки дексаметазона в воспаленные легкие

Abstract

Поскольку многочисленные заболевания связаны с усилением местного воспаления, направление лекарств на воспаленные участки может быть мощной терапевтической стратегией. Одной из общих характеристик воспаленных эндотелиальных клеток является активация молекулы-1 адгезии сосудистых клеток (VCAM-1).Здесь специфическое сродство между очень поздним антигеном-4 (VLA-4) и VCAM-1 используется для производства биомиметической композиции наночастиц, способной бороться с воспалением. Плазматическая мембрана из клеток, генетически модифицированных для постоянной экспрессии VLA-4, покрыта ядрами полимерных наночастиц, и полученные наночастицы, покрытые клеточной мембраной, проявляют повышенное сродство к клеткам-мишеням, которые сверхэкспрессируют VCAM-1 in vitro. Модельное противовоспалительное лекарство, дексаметазон, инкапсулировано в наноформулировку, обеспечивая улучшенную доставку полезной нагрузки к воспаленным легким и значительную терапевтическую эффективность in vivo.В целом, в этой работе используются уникальные преимущества покрытий биологических мембран для разработки дополнительных специфических свойств нацеливания с использованием естественных взаимодействий мишень-лиганд.

ВВЕДЕНИЕ

Химические и физиологические изменения, связанные с воспалением, являются важной частью врожденной иммунной системы ( 1 ). Провоспалительные процессы могут приводить к высвобождению цитокинов, таких как интерлейкин-6 (IL-6) и фактор некроза опухоли, которые способны влиять на сосудистые изменения, улучшая иммунный ответ в месте стресса или травмы ( 2 ).Они могут включать расширение сосудов и увеличение проницаемости сосудов, что может способствовать более эффективному привлечению иммунных клеток ( 3 , 4 ). На клеточном уровне провоспалительные цитокины вызывают активацию специфических поверхностных маркеров, включая молекулу адгезии сосудистых клеток -1 (VCAM-1) или молекулу межклеточной адгезии -1 (ICAM-1), которые обеспечивают адгезию иммунных клеток на этом участке. воспаления ( 5 , 6 ). Хотя воспаление является неотъемлемым процессом, необходимым для выживания, дисрегулируемая иммунная система участвует в широком диапазоне болезненных состояний ( 7 , 8 ).Актуальность воспаления для заболевания дополнительно подтверждается тем фактом, что воспалительные маркеры, такие как молекулы клеточной адгезии, часто участвуют в патогенезе ( 9 , 10 ), и они были исследованы в качестве терапевтических и диагностических целей.

Платформы на основе наночастиц, особенно функционализированные с помощью активных нацеливающих лигандов, могут служить мощными инструментами для лечения широкого спектра заболеваний, связанных с воспалением ( 11 ).Наряду с этим, нацеленная доставка противовоспалительных агентов в сосудистую сеть пораженных участков через молекулы клеточной адгезии представляет собой многообещающую стратегию ( 12 — 14 ). Используя воспаление в качестве сигнала, был разработан широкий спектр систем нанодоставки для нацеливания на активируемые маркеры, такие как VCAM-1 и ICAM-1 ( 15 — 20 ), и этот подход был использован для лечения таких состояний. как онкологические, так и сердечно-сосудистые заболевания ( 21 — 23 ).В последнее время технология покрытия клеточной мембраны привлекла большое внимание в области наномедицины ( 24 , 25 ). Практически любой тип клеточной мембраны может быть нанесен на поверхность наночастиц, от эритроцитов до раковых клеток, что приводит к созданию наноформ с расширенными функциональными возможностями, которые могут быть адаптированы для конкретных применений ( 26 , 27 ). В частности, наночастицы, покрытые клеточной мембраной, оказались эффективными системами доставки лекарств из-за их увеличенного времени циркуляции и способности самонаведения болезней ( 26 — 28 ).Направляющая способность этих биомиметических наночастиц часто опосредуется белками, которые экспрессируются в исходных клетках, и это наделяет наночастицы способностью специфически взаимодействовать с различными патологическими субстратами. Например, было показано, что наночастицы, покрытые мембраной, полученной из тромбоцитов, специфически нацелены на бактерии, а также на обнаженный субэндотелий в поврежденной сосудистой сети ( 29 ). Подобная платформа, как было показано, нацелена на легкие на мышиной модели метастазов рака ( 30 ).Помимо естественных возможностей биоинтерфейса наночастиц, покрытых клеточной мембраной, их свойства могут быть дополнительно усилены путем введения экзогенных фрагментов на поверхность мембраны. Один из способов добиться этого — связать целевые лиганды через липидный якорь, который затем можно вставить в клеточную мембрану ( 31 , 32 ). Наночастицы, покрытые мембраной эритроцитов, которые демонстрируют длительное кровообращение, были функционализированы таким образом, чтобы повысить их способность нацеливания на рак.

Вместо того, чтобы полагаться на методы пост-изготовления для введения дополнительных функций, наночастицы, покрытые клеточной мембраной, могут быть разработаны с использованием мембраны из генетически модифицированных исходных клеток ( 33 ). Доступен широкий спектр инструментов для введения или повышения экспрессии специфических поверхностных маркеров ( 34 , 35 ), и этот подход позволяет исследователям расширять функциональность платформ нанодоставки на основе клеточных мембран на основе конкретных приложений. потребности ( 36 , 37 ).В этом исследовании мы генетически сконструировали наночастицы, покрытые клеточной мембраной, специально нацеленные на участки воспаления (рис. 1). Известно, что воспаленные эндотелиальные клетки повышают экспрессию VCAM-1 для рекрутирования иммунных клеток, таких как лейкоциты, которые экспрессируют его родственный лиганд, очень поздний антиген-4 (VLA-4) ( 38 ). Чтобы использовать это взаимодействие, мы генетически модифицировали исходную клеточную линию для стабильной экспрессии VLA-4 и собрали сконструированную мембрану для покрытия ядер полимерных наночастиц.Мощный противовоспалительный препарат, дексаметазон (DEX), был использован в качестве полезной нагрузки модели для лечения воспаления. Способность конечной наноформуляции воздействовать на воспаленные клетки без ущерба для активности DEX была впервые протестирована in vitro. Затем терапевтическую эффективность оценивали in vivo с использованием мышиной модели воспаления легких, индуцированного эндотоксином.

Рис. 1 Схематическое изображение наночастиц, покрытых клеточной мембраной, полученных методом генной инженерии, для направленной доставки лекарств в воспаленные легкие.

Клетки дикого типа были генетически сконструированы для экспрессии VLA-4, который состоит из интегринов α4 и β1. Затем плазматическую мембрану из клеток, созданных методом генной инженерии, собирали и наносили на ядра наночастиц, нагруженные дексаметазоном (DEX-NP). Полученный в результате VLA-4-экспрессирующий клеточный DEX-NP, покрытый мембраной (VLA-DEX-NP), может нацеливать VCAM-1 на воспаленные эндотелиальные клетки легких для усиления доставки лекарственного средства.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

VLA-4 представляет собой гетеродимер, который образуется в результате ассоциации интегрина α4 с интегрином β1 ( 39 ).Чтобы создать клеточную линию, постоянно отображающую полный комплекс, мы решили модифицировать клетки C1498 дикого типа (C1498-WT), которые, как было подтверждено, экспрессируют высокие уровни интегрина β1, но не имеют интегрина α4 (фиг. 2A). После вирусной трансдукции C1498-WT для введения гена интегрина α4 было обнаружено, что субпопуляция полученных сконструированных клеток (обозначенная как C1498-VLA) экспрессирует оба компонента VLA-4 (фиг. 2B). После успешного установления C1498-VLA клетки собирали и извлекали их мембрану с помощью процесса, включающего лизис клеток и дифференциальное центрифугирование.Затем клеточную мембрану наносили на ядра наночастиц поли (молочная- со -гликолевой кислотой) (PLGA), которые были приготовлены методом одной эмульсии. Наночастицы с мембранным покрытием, полученные с мембраной из C1498-WT и C1498-VLA (называемые WT-NP и VLA-NP, соответственно), оба имели средний диаметр примерно 175 нм, что немного больше, чем у ядер PLGA без покрытия ( Рис. 2C). С точки зрения дзета-потенциала наночастицы, покрытые мембраной, показали поверхностный заряд примерно -20 мВ, который был менее отрицательным, чем ядра PLGA (рис.2D). Данные как по размеру, так и по дзета-потенциалу свидетельствуют о надлежащем покрытии мембраны, что было дополнительно подтверждено для VLA-NP с помощью просвечивающей электронной микроскопии, которая четко показала мембранный слой, окружающий ядро ​​(рис. 2E). Вестерн-блоттинг-анализ использовали для исследования двух компонентов VLA-4 в наноформах (фиг. 2F). Как и ожидалось, интегрины α4 и β1 были обнаружены на VLA-NP, тогда как только интегрин β1 присутствовал на WT-NP. Для оценки долговременной стабильности наночастиц, покрытых мембраной, их суспендировали в 10% растворе сахарозы при 4 ° C, и их размер контролировали в течение 8 недель (рис.2G). Ни один из образцов наночастиц не показал значительного увеличения размера в течение этого периода.

Рис. 2 Разработка и характеристика наночастиц, направленных на воспаление.

( A и B ) Экспрессия интегринов α4 и β1 на клетках C1498-WT (A) и C1498-VLA (B) была подтверждена с помощью проточной цитометрии. ( C и D ) Средний диаметр (C) и поверхностный дзета-потенциал (D) ядер PLGA, WT-NP и VLA-NP были подтверждены динамическим светорассеянием ( n = 3, среднее + SD ).( E ) Типичное изображение VLA-NP, полученное с помощью просвечивающей электронной микроскопии (масштабная линейка, 100 нм). ( F ) Вестерн-блоттинг интегринов α4 и β1 на WT-NP и VLA-NP. ( G ) Размер WT-NP и VLA-NP при хранении в растворе в течение 8 недель ( n = 3, среднее ± стандартное отклонение).

Связывание VLA-NP оценивали в двух различных экспериментах in vitro. Во-первых, C1498-WT, трансдуцированный для постоянной экспрессии высоких количеств VCAM-1 (обозначаемый как C1498-VCAM), использовали в качестве модели клетки-мишени.Экспрессия VCAM-1 на C1498-VCAM была подтверждена с помощью проточной цитометрии (фиг. 3A). В то время как клетки C1498-WT не проявляли никакой экспрессии, клетки C1498-VCAM давали сигнал, который был более чем на порядок выше, чем у изотипического контроля. Для оценки связывания меченные флуоресцентным красителем WT-NP или VLA-NP инкубировали либо с C1498-WT, либо с C1498-VCAM (рис. 3, B и C). Для каждой пары инкубацию проводили с анти-VCAM-1 или без него, чтобы блокировать специфическое взаимодействие между VLA-4 и VCAM-1.Для образцов с блокировкой клетки сначала инкубировали с антителом в течение 30 мин перед обработкой наночастицами. После инкубации с наночастицами в течение 30 мин клетки дважды промывали и анализировали проточной цитометрией. Данные показали, что значительное связывание наночастиц происходило только тогда, когда VLA-NP были спарены с C1498-VCAM. Уровень связывания снижался до исходного уровня в присутствии анти-VCAM-1, тем самым подтверждая специфичность взаимодействия. Напротив, не было доказательств специфического связывания, когда VLA-NP были спарены с C1498-WT, который не экспрессирует родственный рецептор для VLA-4.То же самое справедливо для WT-NP в паре с любым типом клеток, где блокирование антител не влияло на относительное связывание наночастиц.

Рис. 3 Связывание in vitro.

( A ) Экспрессия VCAM-1 на клетках C1498-WT и C1498-VCAM (серый, изотипическое антитело; зеленый, анти – VCAM-1). ( B и C ) Связывание WT-NP (B) или VLA-NP (C) с клетками C1498-WT или C1498-VCAM; блокирование осуществляли путем предварительной инкубации клеток с анти-VCAM-1 ( n = 3, среднее + SD).**** P <0,0001, тест Стьюдента t . ( D ) Экспрессия VCAM-1 на необработанных или обработанных LPS клетках bEnd.3 (серый цвет — изотипическое антитело; зеленый — антитело против VCAM-1). ( E и F ) Связывание WT-NP (E) или VLA-NP (F) с необработанными или обработанными LPS клетками bEnd.3; блокирование осуществляли путем предварительной инкубации клеток с анти-VCAM-1 ( n = 3, среднее + SD). ** P <0,01, тест Стьюдента t .

Затем мы решили изучить связывание наночастиц с эндотелиальными клетками, которые представляют собой более биологически значимую мишень по сравнению с искусственно созданными клетками C1498-VCAM.Для этой цели мы использовали линию эндотелиальных клеток головного мозга мышей, bEnd.3, экспрессия VCAM-1 которой может повышаться в присутствии провоспалительных сигналов ( 40 ). Чтобы вызвать воспаленное состояние, клетки bEnd.3 обрабатывали бактериальным липополисахаридом (LPS), а уровень экспрессии VCAM-1 оценивали с помощью проточной цитометрии (фиг. 3D). В то время как экспрессия VCAM-1 была близка к исходным уровням для необработанных клеток bEnd.3, клетки, обработанные LPS, демонстрировали отдельную популяцию с повышенным VCAM-1.Как мы наблюдали в предыдущем эксперименте с клетками C1498-VCAM, усиленное связывание наночастиц наблюдалось только тогда, когда VLA-NP сочетались с воспаленными клетками bEnd.3, а блокирование антителами снижало уровни до исходного уровня (рис. 3, E и F). . При инкубации с невоспаленными клетками bEnd.3 не было доказательств специфических взаимодействий связывания, и то же самое справедливо для контрольного WT-NP в паре с клетками bEnd.3 независимо от их воспалительного статуса. Данные этих двух исследований подтвердили успешную разработку наночастиц с мембранным покрытием, способных бороться с воспалением на основе взаимодействия между VLA-4 и VCAM-1.

В качестве модельной противовоспалительной полезной нагрузки мы выбрали DEX, который был загружен в ядро ​​PLGA методом одной эмульсии перед покрытием мембраной C1498-WT или C1498-VLA с получением DEX-нагруженного WT-NP или VLA-NP. (именуемые WT-DEX-NP или VLA-DEX-NP соответственно). Когда содержание лекарственного средства измеряли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), было определено, что эффективность инкапсуляции и выход загрузки лекарственного средства составляли приблизительно 11 и 2 мас.% (Мас.%) Соответственно (рис.4А). Для оценки высвобождения лекарственного средства VLA-DEX-NP подвергали диализу против большого объема фосфатно-солевого буфера (PBS), и количество лекарственного средства, удерживаемого в наночастицах, определяли количественно с течением времени (фиг. 4B). Результаты показали начальный выброс, при котором примерно 80% полезной нагрузки лекарственного средства было высвобождено в течение первого часа, после чего последовало замедленное высвобождение. Профиль высвобождения соответствовал предыдущим отчетам о составах PLGA, нагруженных DEX ( 41 , 42 ), и данные показали хорошее соответствие модели Пеппаса-Сахлина с коэффициентом регрессии 0.978 ( 43 ). Чтобы оценить биологическую активность DEX, загруженного в наночастицы, мы использовали анализ in vitro, основанный на обработке LPS дендритных клеток DC2.4, что вызывает повышение уровней провоспалительных цитокинов, таких как IL-6 (рис. 4C). ). Клетки DC2.4 сначала обрабатывали либо свободным DEX, либо VLA-DEX-NP в течение 2 часов с последующей инкубацией с LPS в течение ночи. Затем собирали супернатант для измерения концентрации IL-6 с помощью иммуноферментного анализа (ELISA).Было показано, что как свободный DEX, так и VLA-DEX-NP способны ослаблять секрецию IL-6 зависимым от концентрации лекарственного средства способом (рис. 4D). Хотя свободный DEX более эффективно снижал уровни IL-6 при концентрациях лекарственного средства 0,01 и 0,1 мкМ, уровень воспаления снижался до уровней, близких к исходным, как для свободного DEX, так и для VLA-DEX-NP при 1 мкМ лекарственного средства. Данные показали, что активность полезной нагрузки лекарственного средства сохранялась после загрузки внутрь VLA-NP. Было подтверждено, что ни ядра PLGA, ни VLA-NP без загрузки DEX не влияли на уровень продукции IL-6 DC2.4 ячейки (рис. 4Е).

Рис. 4 Загрузка лекарственного средства и активность in vitro.

( A ) Загрузка лекарственного средства (DL) и эффективность инкапсуляции (EE) дексаметазона (DEX) в VLA-NP ( n = 3, среднее + SD). ( B ) Профиль высвобождения лекарства VLA-DEX-NP ( n = 3, среднее ± стандартное отклонение). Данные были подогнаны с использованием уравнения Пеппаса-Сахлина (пунктирная линия). ( C ) Секреция IL-6 клетками DC2.4, обработанными LPS ( n = 3, среднее + SD). УД, не обнаруживается.( D ) Секреция IL-6 обработанными LPS клетками DC2.4, предварительно инкубированными с DEX в свободной форме или загруженными в VLA-NP ( n = 3, среднее ± стандартное отклонение). ( E ) Относительный воспалительный ответ, измеренный по секреции IL-6, клеток DC2.4, обработанных только LPS, наночастицами LPS и PLGA, LPS и VLA-NP, только наночастицами PLGA или только VLA-NP; все наночастицы были пустыми без загрузки DEX ( n = 3, среднее + стандартное отклонение). NS, не значимо (по сравнению с группой, получавшей только LPS), односторонний дисперсионный анализ (ANOVA).

После подтверждения биологической активности состава VLA-DEX-NP in vitro, мы затем попытались оценить состав in vivo, используя мышиную модель воспаления легких. Модель была создана путем интратрахеальной инъекции ЛПС непосредственно в легкие мышей BALB / c. Чтобы оценить способность к нацеливанию, флуоресцентно меченые WT-NP или VLA-NP вводили внутривенно после индукции воспаления легких. Через 6 часов основные органы, включая сердце, легкие, печень, селезенку, почки и кровь, были собраны для оценки биораспределения наночастиц (рис.5А). Большинство наночастиц накапливается в печени и селезенке. Примечательно, что в легких наблюдалось значительное увеличение накопления VLA-NP по сравнению с WT-NP. Этот результат нацеливания in vivo согласуется с данными in vitro, согласно которым VLA-NP были способны специфически связываться с воспаленными клетками. Безопасность препарата оценивалась путем мониторинга уровней креатинина в плазме, маркера токсичности для почек, который ранее был изучен в контексте нанодоставки DEX ( 44 ).После 9 дней повторных ежедневных введений свободного DEX или VLA-DEX-NP здоровым мышам было показано, что концентрация креатинина у мышей, получавших VLA-DEX-NP, оставалась совместимой с исходными уровнями, тогда как она была значительно повышена у мышей, которым вводили бесплатный DEX (рис. 5Б).

Рис. 5 Таргетинг, безопасность и терапевтическая эффективность in vivo.

( A ) Биораспределение WT-NP или VLA-NP в модели воспаления легких через 6 часов после внутривенного введения ( n = 3, среднее + SD).* P <0,05, тест Стьюдента t . AU, условные единицы. ( B ) Уровни креатинина в плазме мышей после повторных ежедневных введений в течение 9 дней со свободным DEX или VLA-DEX-NP ( n = 3, среднее + SD). * P <0,05, однофакторный дисперсионный анализ. ( C ) Уровни IL-6 в легочной ткани мышей, интратрахеально зараженных LPS и затем обработанных внутривенно раствором носителя, свободным DEX, WT-DEX-NP или VLA-DEX-NP ( n = 3, среднее ± SD).*** P <0,001, **** P <0,0001 (по сравнению с VLA-DEX-NP), односторонний дисперсионный анализ. ( D ) Типичные гистологические срезы легких, окрашенные гематоксилином и эозином мышей, интратрахеально зараженных LPS, а затем обработанных внутривенно раствором носителя, свободным DEX, WT-DEX-NP или VLA-DEX-NP (масштабная линейка, 100 мкм) .

Затем оценивали терапевтическую эффективность VLA-DEX-NP, следуя той же экспериментальной схеме, что и целевое исследование. Через 6 часов легкие собирали и гомогенизировали, затем гомогенат осветляли центрифугированием и фильтровали через фильтр 0.Пористая мембрана 22 мкм перед измерением концентрации IL-6 с помощью ELISA. Как показано на фиг. 5C, композиция VLA-DEX-NP была способна полностью устранить воспаление легких, в то время как как свободный DEX, так и WT-DEX-NP не оказали заметного эффекта. Тот факт, что WT-DEX-NP не был способен значительно снижать уровни IL-6 в легких, свидетельствует о том, что системное воздействие DEX не было основным фактором эффективности, наблюдаемой с VLA-DEX-NP. Эффективность препарата против воспаления легких была дополнительно подтверждена анализом срезов легких, окрашенных гематоксилином и эозином (рис.5D). Рекрутинг лейкоцитов и утолщение перибронхов, которые являются признаками воспаления легких ( 45 , 46 ), были заметными в легких мышей, не получавших лечения, свободного DEX или WT-DEX-NP. Напротив, минимальное рекрутирование лейкоцитов и отсутствие перибронхиального утолщения наблюдались в группе, получавшей VLA-DEX-NP, и не было других признаков токсичности, присутствующих в этих срезах легких. В целом результаты исследований in vivo подтвердили пользу адресной доставки в воспаленные легкие с использованием VLA-NP в качестве наноносителя лекарства.

В заключение, мы разработали наночастицы, покрытые клеточной мембраной, которые можно использовать для целенаправленного воздействия и лечения локализованного воспаления легких путем системного введения. Клетка-хозяин, положительная по интегрину β1, была модифицирована для экспрессии интегрина α4. Вместе два белковых маркера сформировали VLA-4, который специфически взаимодействует с VCAM-1, общим маркером воспаления, обнаруживаемым в эндотелии сосудов. Наночастицы, изготовленные с использованием мембраны из этих генно-инженерных клеток, были способны усилить это естественное сродство к пораженным участкам воспаления, в том числе в мышиной модели LPS-индуцированного воспаления легких.Когда наночастицы были загружены противовоспалительным препаратом DEX, in vivo была достигнута значительная терапевтическая эффективность. В будущих исследованиях будет проведена всесторонняя оценка профиля безопасности состава VLA-DEX-NP, получены дополнительные данные об эффективности, специфичной для легких, выяснены оптимальные временные рамки для лечения и оценена клиническая значимость с использованием дополнительных моделей тяжелого воспалительного заболевания на животных. Поскольку патологическое воспаление в значительной степени вовлечено в ряд важных болезненных состояний ( 7 , 47 ), заявленная биомиметическая платформа может быть использована для улучшения in vivo активности различных терапевтических нагрузок за счет улучшенного нацеливания.Примечательно, что повышающая регуляция VCAM-1 наблюдалась при почечных патологиях, а также при воспалении сосудов головного мозга ( 48 , 49 ). Кроме того, было показано, что DEX эффективен при лечении воспаления, связанного с COVID-19 ( 50 ), а целевой состав, способный локализовать лекарство в легких, может помочь еще больше повысить его терапевтический профиль. В этой работе мы специально сконструировали наночастицы для отображения VLA-4, который представляет собой сложный, многокомпонентный мембраносвязанный лиганд, который в противном случае было бы невозможно включить с использованием традиционных синтетических стратегий.Это подчеркивает преимущества использования методов генной инженерии для расширения широкого применения технологии покрытия клеточной мембраны. В частности, обобщенное применение этого подхода позволило бы исследователям упростить разработку новых целевых наноформулировок с помощью взаимодействий мишень-лиганд, которые происходят в природе. В сочетании с характеристиками биосовместимости и биоинтерфейса, присущими покрытиям клеточных мембран, представленная здесь работа могла бы инициировать новую волну биомиметической наномедицины с тщательно продуманными функциями.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Культура клеток

Клетки лейкемии мышей C1498 дикого типа (TIB-49, Американская коллекция типовых культур) культивировали при 37 ° C в 5% CO. ₂ в среде Игла, модифицированной Дульбекко [DMEM; с l-глутамином, глюкозой (4,5 г / литр) и пируватом натрия; Corning] с добавлением 10% ростовой сыворотки крупного рогатого скота (BGS; Hyclone) и 1% пенициллин-стрептомицина (Pen-Strep; Gibco). Сконструированные клетки C1498-VCAM культивировали с DMEM с добавлением 10% U.S. Фетальная бычья сыворотка Министерства сельского хозяйства США (FBS; Omega Scientific), 1% Pen-Strep и гигромицин B (400 мкг / мл; InvivoGen). Сконструированные клетки C1498-VLA культивировали с DMEM с добавлением 10% USDA FBS, 1% Pen-Strep и пуромицина (1 мкг / мл; InvivoGen). Эндотелиальные клетки мозга мыши bEnd.3 (CRL-2299, Американская коллекция типовых культур) культивировали с DMEM с добавлением 10% BGS и 1% Pen-Strep. Клетки AmphoPhoenix (полученные из Национального биорепозитория генов векторов) культивировали с DMEM с добавлением 10% BGS и 1% Pen-Strep.Дендритные клетки мыши DC2.4 (SCC142, Sigma-Aldrich) культивировали с DMEM с добавлением 10% BGS и 1% Pen-Strep.

Генная инженерия

Сконструированные клетки C1498-VLA и C1498-VCAM были созданы путем трансдукции C1498-WT. Вкратце, гены интегрина α4 (MG50049-M, Sino Biological) и VCAM-1 (MG50163-UT, Sino Biological) были клонированы в плазмиды pQCXIP и pQCXIH (Clontech), соответственно, с использованием набора для клонирования In-Fusion HD ( Clontech) в соответствии с протоколом производителя, что дает pQCXIP-α4 и pQCXIH-VCAM-1.Клетки AmphoPhoenix высевали на 100-миллиметровые чашки для культивирования тканей, содержащие 10 мл среды при 3 × 10 ⁵ клеток / мл, и культивировали в течение ночи. Клетки трансфицировали pQCXIP-α4 или pQCXIH-VCAM-1, используя Lipofectamine 2000 (Invitrogen), следуя инструкциям производителя. Супернатант трансфицированного AmphoPhoenix собирали и использовали для ресуспендирования клеток C1498-WT, которые затем центрифугировали при 800 g в течение 90 мин. После вращения трансдуцированные клетки инкубировали в течение 4 часов перед заменой среды на свежую.Флуоресцентно меченые антитела, включая FITC (флуоресцеинизотиоцианат) против CD49d мыши (R1-2, BioLegend), Alexa647 против CD29 мыши / крысы (HMβ1-1, BioLegend) или PE (фикоэритрин) против CD106 мыши (STA, BioLegend). ), были использованы для оценки уровней экспрессии VLA-4 или VCAM-1. Данные были собраны с использованием проточного цитометра Becton Dickinson FACSCanto-II и проанализированы с использованием программного обеспечения FlowJo. Все сконструированные клетки были отсортированы с использованием проточного цитометра Becton Dickinson FACSAria-II для отбора клеток, экспрессирующих высокие уровни VLA-4 или VCAM-1.

Получение клеточной мембраны

Мембраны из клеток C1498-WT и сконструированных C1498-VLA были получены с использованием ранее описанного метода с некоторыми модификациями ( 51 ). Сначала клетки собирали и промывали в исходном буфере, содержащем 30 мМ трис-HCl (pH 7,0) (Quality Biological) с 0,0759 М сахарозой (Sigma-Aldrich) и 0,225 М d-маннитолом (Sigma-Aldrich). Промытые клетки ресуспендировали в буфере для выделения, содержащем 0,5 мМ этиленгликоль-бис (β-аминоэтиловый эфир) — N , N , N ‘, N ‘ -тетрауксусную кислоту (Sigma-Aldrich), a коктейль ингибиторов фосфатазы (Sigma-Aldrich) и коктейль ингибиторов протеазы (Sigma-Aldrich).Затем клетки гомогенизировали с использованием гомогенизатора зондов Kinematica Polytron PT 10/35 при мощности 70% за 15 проходов. Гомогенат сначала центрифугировали при 10 000 г в ультрацентрифуге Beckman Coulter Optima XPN-80 в течение 25 мин. Затем собирали супернатант и центрифугировали при 150 000 г в течение 35 мин. Полученный осадок клеточной мембраны промывали и хранили в растворе, содержащем 0,2 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты (USB Corporation) в дистиллированной воде UltraPure без ДНКазы / без РНКазы (Invitrogen).Общее содержание мембранного белка определяли количественно с помощью набора для анализа белка BCA (Pierce).

Синтез наночастиц с мембранным покрытием

Полимерные ядра были приготовлены с помощью процесса одной эмульсии с использованием 50:50 PLGA с концевыми карбоксильными группами (0,66 дл / г; абсорбируемые полимеры LACTEL). Для ядер PLGA, нагруженных DEX, 500 мкл PLGA (50 мг / мл) в дихлорметане (DCM; Sigma-Aldrich) смешивали с 500 мкл DEX (10 мг / мл) в ацетоне. Эту смесь добавляли к 5 мл 10 мМ трис-HCl (pH 8) и обрабатывали ультразвуком, используя звуковой дисмембратор Thermo Fisher Scientific 150E при мощности 70% в течение 2 минут.Обработанную ультразвуком смесь добавляли к 10 мл 10 мМ трис-HCl (pH 8) и перемешивали на магнитной мешалке при 700 об / мин в течение ночи. Для мечения 1,1′-диоктадецил-3,3,3 ‘, 3’-тетраметилиндодикарбоцианина (DiD, ex / em = 644/663 нм; Biotium) 500 мкл PLGA (50 мг / мл) в DCM смешивали с 500 мкл DiD (20 мкг / мл) в DCM. Эту смесь добавляли к 5 мл 10 мМ трис-HCl (pH 8) и обрабатывали ультразвуком, используя звуковой дисмембратор Thermo Fisher Scientific 150E при мощности 70% в течение 2 минут. Обработанную ультразвуком смесь добавляли к 10 мл 10 мМ трис-HCl (pH 8) и перемешивали на магнитной мешалке при 700 г в течение 3 часов.Подготовка пустого ядра PLGA выполнялась по той же процедуре, за исключением замены раствора DiD на 500 мкл чистого DCM. Чтобы покрыть полимерные ядра клеточными мембранами, ядра наночастиц сначала центрифугировали при 21 100 g в течение 8 мин. Осадки ресуспендировали в растворе, содержащем мембраны, полученные из C1498-WT или C1498-VLA. Смесь обрабатывали ультразвуком в одноразовой калибровочной кювете объемом 1,5 мл (BrandTech Scientific Inc.) с использованием ультразвукового устройства для ванны Thermo Fisher Scientific FS30D с частотой 42 кГц и мощностью 100 Вт в течение 3 мин.Для исследований in vitro добавляли воду UltraPure и сахарозу, чтобы довести концентрацию полимера до 1 мг / мл и концентрацию сахарозы до 10%. Для исследований in vivo добавляли воду UltraPure и сахарозу, чтобы довести концентрацию полимера до 10 мг / мл и концентрацию сахарозы до 10%.

Характеристики наночастиц

Размер и дзета-потенциал поверхности WT-NP и VLA-NP измеряли с помощью динамического светорассеяния с использованием Malvern ZEN 3600 Zetasizer. Для визуализации с помощью электронной микроскопии образец VLA-NP был отрицательно окрашен 1 мас.% Уранилацетата (электронная микроскопия) на медной сетке 400 меш с углеродным покрытием (электронная микроскопия) и визуализирован с помощью просвечивающего электронного микроскопа JEOL 1200 EX II. .Присутствие VLA-4 на WT-NP и VLA-NP определяли с помощью вестерн-блоттинга. Сначала образцы доводили до содержания белка 1 мг / мл, после чего добавляли буфер для загрузки образцов додецилсульфата лития NuPAGE 4 × (Novex) и нагревали при 70 ° C в течение 10 мин. Затем 25 мкл загружали в лунки 12-луночных гелей Bolt 4 с 12% Bis-Tris (Invitrogen) и прогоняли при 165 В в течение 45 минут в рабочем буфере MOPS (Novex). Белки переносили в течение 60 мин при напряжении 10 В на нитроцеллюлозные мембраны 0,45 мкм (Pierce) в буфере для переноса Bolt (Novex).Неспецифические взаимодействия блокировали с использованием 5% молока (Genesee Scientific) в PBS (Thermo Fisher Scientific) с 0,05% Tween 20 (National Scientific). Блоты исследовали с использованием антитела против интегрина α4 (B-2, Santa Cruz Biotechnology) или антитела против интегрина β1 (E-11, Santa Cruz Biotechnology). Вторичное окрашивание проводили с использованием соответствующих антител, конъюгированных с пероксидазой хрена (BioLegend). Мембраны с окрашенными образцами проявляли в темной комнате с использованием субстрата для вестерн-блоттинга ECL (Pierce) и ImageWorks Mini-Medical / 90 Developer.Долговременную стабильность WT-NP и VLA-NP в 10% растворе сахарозы тестировали путем хранения частиц при 4 ° C в течение 2 месяцев с еженедельными измерениями размера.

Исследования связывания

Уровень экспрессии VCAM-1 на C1498-WT, C1498-VCAM, необработанных клетках bEnd.3 и клетках bEnd.3, обработанных в течение ночи LPS (1 мкг / мл) из Escherichia coli K12 ( LPS; InvivoGen) оценивали, как описано выше. Для первого исследования связывания собирали 5 × 10 ⁴ клеток C1498-WT или C1498-VCAM и ресуспендировали в 160 мкл DMEM, содержащей 0.5% USDA FBS, 1% бычий сывороточный альбумин (BSA; Sigma-Aldrich) и 1 мМ MnCl ₂ (Sigma-Aldrich). Для блокирования к клеткам добавляли антитело против CD106 мыши с последующей инкубацией при 4 ° C в течение 30 мин. Затем добавляли 40 мкл меченного DiD (1 мг / мл) WT-NP или VLA-NP, и смесь инкубировали при 4 ° C еще 30 мин. После двукратной промывки клеток PBS флуоресцентные сигналы от клеток детектировали с помощью проточной цитометрии. Для второго исследования высевали 5 × 10 ⁴ клеток bEnd.3 и затем либо оставляли без обработки, либо предварительно обрабатывали LPS в течение ночи.Затем среду удаляли и заменяли 160 мкл DMEM, содержащей 0,5% USDA FBS, 0,8% BSA и 1 мМ MnCl ₂ . Для блокирования к клеткам добавляли антитело против CD106 мыши с последующей инкубацией при 4 ° C в течение 30 мин. Затем добавляли 40 мкл меченного DiD (1 мг / мл) WT-NP или VLA-NP, и смесь инкубировали при 4 ° C еще 30 мин. После двукратной промывки клеток PBS клетки отделяли соскабливанием, и флуоресцентные сигналы от клеток детектировали с помощью проточной цитометрии.Все данные были собраны с использованием проточного цитометра Becton Dickinson FACSCanto-II и проанализированы с помощью программного обеспечения FlowJo.

Загрузка и высвобождение лекарства

Эффективность загрузки и инкапсуляции лекарства измеряли с помощью ВЭЖХ на системе градиентной жидкостной хроматографии Agilent 1220 Infinity II, оснащенной аналитической колонкой C18 (Brownlee). Образцы VLA-DEX-NP растворяли в течение ночи в 80% ацетонитриле (ACN; EMD Millipore), а затем центрифугировали при 21 100 g в течение 8 минут для сбора супернатанта для анализа.Растворы пропускали через колонку со скоростью 0,3 мл / мин, и DEX детектировали при длине волны 242 нм. Профиль высвобождения DEX получали, загружая 200 мкл VLA-DEX-NP (1 мг / мл) в диализные устройства Slide-A-Lyzer MINI (отсечка молекулярной массы 10K; Thermo Fisher Scientific) и помещая их в 1 литр перемешиваемого PBS. при 150 об. / мин. В каждый момент времени извлекали диализные чашки, и их содержимое центрифугировали при 21 100 g в течение 8 минут. Осадки растворяли в 80% ACN в течение ночи и обрабатывали, как описано выше для анализа ВЭЖХ.

In vitro активность DEX

Биологическая активность DEX оценивалась in vitro с использованием тест-системы, включающей обработку LPS дендритных клеток DC2.4. Для проверки системы клетки DC2.4 сначала высевали на 24-луночный планшет для тканевых культур из расчета 5 × 10 ⁴ клеток на лунку и культивировали в течение ночи с или без ЛПС в концентрации 1 мкг / мл. Затем собирали супернатант и измеряли концентрацию IL-6 с использованием набора ELISA для мышиного IL-6 (BioLegend) в соответствии с протоколом производителя.Чтобы сравнить свободный DEX и VLA-DEX-NP, два препарата сначала добавляли в культуральную среду при конечных концентрациях лекарственного средства 0,01, 0,1 и 1 мкМ, а затем инкубировали в течение 2 часов. Для свободного DEX были приготовлены 1000 × исходные растворы при 0,01, 0,1 и 1 мМ в диметилсульфоксиде. Затем клетки обрабатывали LPS в течение ночи перед измерением концентрации IL-6 в супернатанте. Чтобы проверить эффект пустых наночастиц, ядра PLGA или VLA-NP в конечной концентрации 1 мкг / мл сначала инкубировали с клетками в течение 2 часов, а затем инкубировали в течение ночи с или без LPS перед измерением уровней IL-6. .

Нацеливание на воспаление и биораспределение in vivo

Все эксперименты на животных проводились в соответствии с руководящими принципами Национального института здоровья (NIH) и одобрены Комитетом по уходу и использованию институциональных животных (IACUC) Калифорнийского университета в Сан-Диего. Чтобы вызвать воспаление легких у мышей, самцам мышей BALB / c интратрахеально вводили 30 мкл LPS (400 мкг / мл) в PBS (Charles River Laboratories). Через 1 час после инъекции LPS внутривенно вводили 100 мкл меченного DiD (10 мг / мл) WT-NP или VLA-NP.Через 6 часов собирали сердце, легкие, печень, селезенку, почки и кровь. Все твердые ткани промывали PBS и суспендировали в 1 мл PBS перед гомогенизацией с помощью Biospec Mini-Beadbeater-16. Затем гомогенаты и кровь разбавляли в 4 раза PBS и добавляли в 96-луночный планшет, и флуоресценцию измеряли с использованием считывающего устройства для микропланшетов BioTek Synergy Mx. Для каждого образца вычитали фоновый сигнал, измеренный от соответствующего органа или крови контрольных мышей, которые не получали никакого лечения.

Безопасность in vivo

Самцам мышей BALB / c внутривенно вводили 100 мкл свободного DEX или VLA-DEX-NP, каждый в концентрации 200 мкг / мл, ежедневно в течение первых 7 дней. Затем в течение следующих 2 дней дозировку удвоили путем инъекции 200 мкл каждого препарата при той же концентрации лекарственного средства. Через 24 часа после последней инъекции кровь собирали посредством подчелюстной пункции и собирали в пробирки, содержащие гепарин натрия (Sigma-Aldrich). Образцы плазмы получали путем взятия супернатанта крови после центрифугирования при 800 g в течение 10 мин.Уровни креатинина измеряли с помощью набора для колориметрического анализа креатинина (Cayman Chemical Company) в соответствии с протоколом производителя.

Исследования лечения воспаления

Для лечения воспаления легких самцов мышей BALB / c сначала интратрахеально заражали 30 мкл LPS (400 мкг / мл) в PBS. Через 1 час после контрольного заражения внутривенно вводили 100 мкл свободного DEX, WT-DEX-NP и VLA-DEX-NP, каждая в концентрации 200 мкг / мл. Через 6 часов легкие собирали и гомогенизировали, как описано выше.Гомогенаты центрифугировали при 10000 г и супернатанты фильтровали через шприцевые фильтры из поливинилидендифторида 0,22 мкм (CELLTREAT). Концентрацию ИЛ-6 измеряли с использованием набора для ELISA мышиного ИЛ-6 в соответствии с протоколом производителя. Для гистологического анализа легкие собирали через 6 часов и фиксировали в 10% забуференном фосфатом формалине (Fisher Chemical) в течение 24 часов. Были сделаны срезы фиксированных легких с последующим окрашиванием гематоксилином и эозином (Sakura Finetek).Гистологические слайды были подготовлены Совместным ресурсом тканевых технологий Центра рака Мура (грант поддержки онкологического центра P30CA23100). Изображения были получены с использованием слайд-сканера Hamamatsu NanoZoomer 2.0-HT и проанализированы с помощью программного обеспечения NanoZoomer Digital Pathology.

Выражение признательности: Финансирование: Эта работа была поддержана Национальными институтами здравоохранения в рамках награды No. R01CA200574 и Объединенное научное и технологическое бюро для химической и биологической защиты Агентства по уменьшению угрозы обороны в рамках гранта №HDTRA1-18-1-0014. J.H.P. был поддержан грантом на обучение 5T32CA153915 Национального института здоровья Национального института рака. Вклад авторов: J.H.P., Y.J., R.H.F. и L.Z. задумал и спланировал эксперименты. J.H.P., Y.J., J.Z., H.G., A.M. и J.H. провели все эксперименты. Все авторы проанализировали и обсудили данные. J.H.P., A.M., R.H.F. и L.Z. написал газету. Конкурирующие интересы: Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов. Доступность данных и материалов: В документе представлены все данные, необходимые для оценки выводов, сделанных в статье.

• Copyright © 2021 Авторы, некоторые права защищены; эксклюзивный лицензиат Американской ассоциации содействия развитию науки. Нет претензий к оригинальным работам правительства США. Распространяется по некоммерческой лицензии Creative Commons Attribution 4.0 (CC BY-NC).

Профили DISC: 6 основных типов профилей

Какие 6 основных типов профилей?

Девяносто девять процентов всех людей, которые сдают расширенную оценку DISC, используют комбинацию стилей DISC.Основные типы профилей описывают 6 профилей DISC, которые представляют собой комбинацию двух стилей DISC. Это второй по распространенности тип профиля после профилей с тремя стилями DISC. Это DI / ID, SC / CS, IS / SI, DC / CD, DS / SD и IC / CS. Порядок идентификации основных профилей ДИСКА не критичен.

Зачем нужны базовые типы профилей?

Мы можем легко описать D-стиль или S-стиль, но может быть сложнее описать профиль DS или профиль ID.Базовые типы профиля помогают нам описать стиль человека, выходящий за рамки его основного стиля. Это просто еще один способ описания профилей с помощью двух стилей DISC, чтобы помочь нам лучше понять себя и других.

Профиль DI / ID: «Продаю — веду» Тип профиля

Профиль «Я продаю — я веду» идентифицирует человека, у которого есть комбинация стиля D и стиля I над средней линией на графике профиля II. Они расположены на активной правой стороне модели Extended DISC ^® Diamond.Активные стили предпочитают работать в быстро меняющейся среде, менее сосредоточены на деталях, склонны быстрее принимать решения и более комфортно относятся к изменениям.

Эти типы профилей не являются автоматически руководителями или специалистами по продажам. Профили «Я продаю — веду», как правило, имеют четкое представление о том, чего они хотят. Сторона человека в стиле I — комфортно убеждать и продвигать свои идеи. Сторона человека в стиле D может спокойно продвигать свои идеи. Профили «Я продаю — я веду», как правило, действуют независимо и сосредоточены на движении вперед.Их мотивируют четкие цели и сложные задачи.

Профиль SC / CS: Тип профиля «I Execute»

Профиль «Я выполняю» идентифицирует человека, который представляет собой комбинацию S-стиля и C-стиля. Их профиль будет отображаться на левой стороне зарезервированной модели Extended DISC ^® Diamond. Зарезервированные стили естественно более тихие. Они предпочитают работать в проверенных условиях; здесь и сейчас. Они хотят знать детали и, как правило, медленнее принимают решения.

Профили «Я выполняю» являются «исполнителями» стилей.Они добиваются своего, и если им даны четкие инструкции, они сделают это правильно. Они будут делать то, о чем договорились, следуя правилам и инструкциям. Эти люди находят мотивацию в четких инструкциях и индивидуальной обратной связи.

Профиль IS / SI: «Я участвую» Тип профиля

Профиль «Я участвую» отображается в нижней части ориентированной на людей модели Extended DISC ^® Diamond. Профиль «Я участвую» — это кто-то с комбинацией I-стиля и S-стиля.Это стили, ориентированные на людей, которые предпочитают сосредотачиваться на людях и чувствах, а не на задачах.

Профили «Я участвую» удобны для эмоционального вовлечения. Они получают энергию от взаимодействия с другими людьми. Профиль «Я участвую» силен в поддержании позитивной атмосферы и, как правило, является сплоченным членом команды. Они мотивированы личным вниманием и групповым участием.

Профиль DC / CD: «Я создаю — создаю» Тип профиля

Профиль «Я строю / создаю» отображается в верхней части ориентированной на задачи модели Extended DISC ^® Diamond.Люди, которые являются профилями «Я строю / создаю», представляют собой комбинацию D-стиля и C-стиля. Эти профили, ориентированные на задачу, предпочитают сосредоточиться на задаче и вещах, а не на людях и чувствах.

Профиль «Я строю — создаю» помогает выполнять задачи. Они склонны знать, чего хотят и как это сделать. Однако они склонны делать это одним способом, а это их путь. Они логически мыслит и мотивированы наличием информации и сложными техническими задачами.

Профиль DS / SD: Профиль «I Plan» Тип

Профиль «Планирую» идентифицирует людей, которые представляют собой сочетание стиля D и S.Это один из типов противоположных профилей. Эти профили менее распространены, потому что стиль D и стиль S, как правило, более противоположны; два стиля не имеют общей оси и находятся на наибольшем расстоянии друг от друга на модели Extended DISC ^® .

Профили

«Планирую» — это продуманные планировщики. Они знают, чего хотят и как этого добиться. Им нравится организовываться и планировать, когда у них есть время, и им нравится свобода принимать решения. Профиль «Планирую» смотрит в будущее и может быть очень настойчивым.

Профиль IC / CI: Тип профиля «Я объясняю»

Профиль «Я объясняю» — это люди, которые представляют собой комбинацию I-стиля и C-стиля. Это также один из типов противоположного профиля и менее распространенный. I-стиль и C-стиль имеют тенденцию быть более противоположными; два стиля не имеют общей оси и находятся на наибольшем расстоянии друг от друга в модели Extended DISC.

Профили «Я объясняю» удобны для общения и часто обладают знаниями, чтобы знать, о чем они говорят.Профили «Я объясняю» любят говорить, и обычно у них есть много информации, которой можно поделиться. Они стремятся стать специалистами или контролерами качества, где они могут объяснить кратко и подробно. Их мотивируют различные контакты и разговоры на конкретные темы.

Использование основных типов профилей для улучшения взаимодействия

Мы можем принимать более обоснованные решения, если у нас будет больше информации о человеке, помимо его основного стиля DISC. Базовые типы профилей обеспечивают более глубокое понимание того, что на самом деле представляет собой профиль DISC человека.

Ключ к определению стиля других — не торопиться и постоянно уточнять свои наблюдения, чтобы мы могли эффективно приспосабливаться. Например, конфликт или недопонимание могут возникнуть, если один человек является профилем «Я веду — продаю» на активной стороне модели, а другой — профилем «Я выполняю» на зарезервированной половине. Однако осознание может помочь превратить это в позитивный обмен, потому что мы знаем об этих различиях. Мы с большей вероятностью будем дополнять друг друга, ценим наши различия.

Шесть типов базовых профилей — это еще один способ помочь нам понять профили DISC и, таким образом, помочь нам достичь более уверенного самосознания и осознания других.

Комбинированный гаечный ключ Gedore с профилем UD 7/32 7 7 / 32AF Ручной инструмент Ключи и гаечные ключи thebladebone

Комбинированный гаечный ключ Gedore, профиль UD 7/32 7 7 / 32AF

Комбинированный гаечный ключ Gedore, профиль UD 7/32 ‘- 7 7 / 32AF: Сделай сам и инструменты. Бесплатная доставка и возврат всех подходящих заказов.Комбинированный гаечный ключ Gedore с профилем UD 7/32 «- 7 7 / 32AF .. Gedore。 Комбинированные ключи。 Гаечные ключи。 По DIN 3113, форма A, ISO 3318, ISO 7738 (только метрические размеры) Кольцо Смещение 15 ° от вала в виде балок Размеры от 3 до 5,5 с шестигранным кольцом, начиная с размера 6 с профилем UD GEDORE ванадиевая сталь 31CrV3, хромированные, полированные кольца * не стандартизированы。。。 ​​

Комбинированный гаечный ключ Gedore UD Профиль 7/32 7 7 / 32AF

12,5-футовая многоцелевая стандартная лестница EN131 Телескопическая лестница SAHZ 3.8M Сверхмощная выдвижная лестница, белый шкаф JOYKK улавливает невидимое нажатие, чтобы открыть магнитные сенсорные защелки Дверца шкафа, антрацит Модель F Почтовый ящик почтового ящика HENGMEI Почтовый ящик из нержавеющей стали с крышкой, запираемый на стену, большой емкости с держателем для газет. Poualss Rebar Wire Twister, Арматура для металлических конструкций с мягкой ручкой, Полуавтоматический выдвижной крюк Инструмент для связывания арматуры на стройплощадке, 30 см. 9-дюймовый регулируемый деревообрабатывающий станок с режущей кромкой, режущая кромка, спица, обрезной инструмент с винтовой плоскостью, цифровой дисплей вольтметра Kafen и прибор для измерения напряжения панели Blue Del Mini для транспортных средств, мотоциклов 12 В постоянного тока.Запорный клапан CIENCIA Латунная душевая лейка Регулирующий клапан Сантехника Запорный клапан Душевой клапан G 1/2 Матовый никель AV016NA, 1,10 x 2,20 м для защиты от пыли Строительная дверь из полипропилена Дверь для защиты от пыли PRODIAMANT из пыленепроницаемого полипропиленового флиса, мини-динамик Портативный мини-путешествия Динамик Td-v26 Цифровой музыкальный проигрыватель Стерео FM-радио Поддержка динамика Sd Tf с зарядным аудиокабелем Зеленый, 4 упаковки Ikea КОМПЛИМЕНТ Стандартные петли 4 упаковки.